脂肪干細(xì)胞旁分泌作用基于TGF-β1-Smads通路對(duì)增生性瘢痕影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：研究在旁分泌環(huán)境條件下，人脂肪干細(xì)胞（Adipose-derived stem cells,ADSCs）對(duì)增生性瘢痕(Hypertrophic Scar,HS）來源的成纖維細(xì)胞(Fibroblasts,Fbs）基于TGF-β1/Smads通路的影響，以及對(duì)增生性瘢痕中Ⅰ/Ⅲ型膠原沉積的影響。
　　方法：從人的脂肪組織中分離提取、培養(yǎng)脂肪干細(xì)胞；從增生性瘢痕患者手術(shù)切除的瘢痕組織中分離、培養(yǎng)增生性瘢痕來源的成纖維細(xì)胞；從正常人

2、皮膚分離培養(yǎng)正常皮膚來源的成纖維細(xì)胞。用Transwell小室建立ADSCs和HS來源的Fbs的共培養(yǎng)模型（實(shí)驗(yàn)組），正常皮膚的Fbs單獨(dú)培養(yǎng)組和HS來源的Fbs單獨(dú)培養(yǎng)組作為對(duì)照組。比較三組Fbs在顯微鏡下的形態(tài)差異，不同的時(shí)間點(diǎn)（1-6day）CCK-8法檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的細(xì)胞增殖的情況，Westernblot法檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組細(xì)胞TGF-β1、P-Smad2/3、Smad7和Ⅰ/Ⅲ型膠原蛋白的表達(dá)情況。
　　結(jié)

3、果：
　?。?）經(jīng)Transwell小室共培養(yǎng)后的實(shí)驗(yàn)組HS來源的Fbs增殖曲線低于單獨(dú)培養(yǎng)HS來源的Fbs，4d后差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），共培養(yǎng)后實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞的增殖曲線仍高于正常皮膚的Fbs單獨(dú)培養(yǎng)組，從3d開始差異縮小，5d時(shí)差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　（2）共培養(yǎng)后實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞的TGF-β1、P-Smad2/3、Ⅰ/Ⅲ型膠原蛋白的表達(dá)低于HS來源的Fbs單獨(dú)培養(yǎng)組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞T