重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子與癡呆腦及其神經(jīng)細(xì)胞凋亡相關(guān)基因的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、暨南大學(xué)碩士學(xué)位論文重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子與癡呆腦及其神經(jīng)細(xì)胞凋亡相關(guān)基因的實(shí)驗(yàn)研究姓名：朱大明申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：遺傳學(xué)指導(dǎo)教師：洪岸20020101‘盧業(yè)滄文：rh—bFGF與癡呆腦及苒神經(jīng)細(xì)胞凋亡相關(guān)基因的實(shí)驗(yàn)研究摘耍rh—bFGF與癡呆腦及其神經(jīng)細(xì)胞凋亡相關(guān)基因的實(shí)驗(yàn)研究碩士研究生朱大明指導(dǎo)教師洪岸副教授林劍教授中文摘要目的：研究重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子(rhbFGF)對原代培養(yǎng)新生大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞的影響和對阿爾茨

2、海默病(AD)模型大鼠的作用。從體內(nèi)和體外兩方面探討rhbFGF對神經(jīng)細(xì)胞凋亡的抑制作用及治療AD的可能性。方法：采用體外培養(yǎng)新生海馬神經(jīng)細(xì)胞，加入聚集狀態(tài)的A1325Ⅲ建立AD樣神經(jīng)細(xì)胞模型在正常成年大鼠腦室內(nèi)注射聚集狀態(tài)的ABzs35建立AD樣大鼠模型：實(shí)驗(yàn)組給予rhbFGF。然后對細(xì)胞模型檢測如下指標(biāo)：Gimea’S，Hoechst33258染色法研究凋亡細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化：AnnexinV法定量分析細(xì)胞凋亡率：瓊脂糖凝膠電泳分析凋

3、亡梯帶；Westenblot分析凋亡相關(guān)基因的表達(dá)：對大鼠模型檢測如下指標(biāo)：Morris水迷宮檢測大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力的變化；免疫組化分析海馬凋亡相關(guān)基因的表達(dá)；HE染色法研究腦組織中凋亡細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化。以觀察rhbFGF對老年性大鼠學(xué)習(xí)記憶障礙、凋亡細(xì)胞、凋亡相關(guān)基因表達(dá)情況的影響。結(jié)果：l在細(xì)胞模型上，1)rhbFGF能改善凋亡細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化。2)rhbFGF能抑制DNA凋亡梯帶的出現(xiàn)，使細(xì)胞凋亡率下降。3)rh—bFGF能上調(diào)

4、凋亡抑制基因Bcl2在蛋白水平上的表達(dá)，下調(diào)凋f：促進(jìn)基因Bax、ICE在蛋白水平上的表達(dá)。2在人鼠模型上，1)，定位航行試驗(yàn)中，模型組大鼠平均逃避潛伏期較正常組明顯延長，而實(shí)驗(yàn)組同模型組比較有顯著縮短；空間探索試驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)組在平臺象限游泳距離百分比明顯高于模型組。2)rhbFGF能改善腦組織中凋亡細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化。3)rhbFGF能L調(diào)凋亡抑制基因Bcl2在蛋白水平上的表達(dá)，F(xiàn)調(diào)凋亡促進(jìn)基因Bax、ICE在蛋白水平上的表達(dá)。結(jié)論：研究