CUMS抑郁模型小鼠下丘腦的蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf

1、研究背景:抑郁癥（depression）是一種普遍多發(fā)的精神類疾病，在整個(gè)人群中具有極高的患病率和復(fù)發(fā)率，更為嚴(yán)重的會導(dǎo)致自殘和自殺，造成了沉重的醫(yī)療負(fù)擔(dān)。抑郁癥的發(fā)生是由多種因素造成的，包括基因和環(huán)境復(fù)雜的相互作用，其中應(yīng)激性生活事件被公認(rèn)為是抑郁癥發(fā)病的重要因素之一。下丘腦-垂體-腎上腺（hypothalamic-pituitary-adrenocortical，HPA）軸是機(jī)體主要的應(yīng)激軸，在抑郁癥的發(fā)病機(jī)制研究中普遍發(fā)現(xiàn)它的功能

2、存在異常。而下丘腦作為神經(jīng)系統(tǒng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)的調(diào)節(jié)樞紐，是HPA軸調(diào)控的核心腦區(qū)，對身體的應(yīng)激反應(yīng)發(fā)揮著至關(guān)重要的作用，在目前的抑郁癥研究中，下丘腦結(jié)構(gòu)及功能的變化鮮有報(bào)道。
　　目的：運(yùn)用蛋白組學(xué)方法分析CUMS抑郁模型小鼠下丘腦差異蛋白的表達(dá)譜及其相關(guān)通路，試圖闡釋這部分差異蛋白改變的病理生理機(jī)制及其功能，最后揭示下丘腦結(jié)構(gòu)功能改變與蛋白表達(dá)譜改變的關(guān)系，探討抑郁癥疾病狀態(tài)下可能的分子機(jī)制，為抑郁癥的診斷和治療提供新的理論依據(jù)。

3、
　　方法：我們隨機(jī)地把正常的C57BL/6J雄性小鼠分為抑郁模型組和正常對照組，每組各15只。待抑郁模型組小鼠進(jìn)行28天的慢性溫和性刺激后，對兩個(gè)組的小鼠進(jìn)行糖水偏好，曠野實(shí)驗(yàn)和強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)等行為學(xué)評價(jià)。然后，隨機(jī)選取每組9只小鼠下丘腦進(jìn)行雙向凝膠電泳分離，挖取差異蛋白點(diǎn)用基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜（MALD-TOF/TOF）進(jìn)行蛋白鑒定，對差異表達(dá)蛋白進(jìn)行生物信息學(xué)分析。另外每組選取6只小鼠，在下丘腦中對差異蛋白進(jìn)行 W

4、estern blot方法驗(yàn)證。
　　結(jié)果：1、抑郁模型組小鼠體重、糖水偏好、曠野實(shí)驗(yàn)和強(qiáng)迫游泳等行為學(xué)均較正常組小鼠有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，說明抑郁模型小鼠構(gòu)建成功。
　　2、對雙向電泳圖像分析發(fā)現(xiàn)模型小鼠下丘腦蛋白表達(dá)譜中在1.5倍以上差異的表達(dá)蛋白點(diǎn)有41個(gè)（P<0.05），通過MALD-TOF/TOF差異蛋白鑒定，最終鑒定出37個(gè)蛋白質(zhì)其中13個(gè)蛋白表達(dá)上調(diào)，24個(gè)蛋白表達(dá)下調(diào)。
　　3、對差異蛋白進(jìn)行GO和KEGG P