白藜蘆醇系列衍生物對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖的影響.pdf

1、目的：探討一系列引入氟原子的白藜蘆醇衍生物對(duì)體外培養(yǎng)的人腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制的影響，為進(jìn)一步研究其抗腫瘤機(jī)制提供基礎(chǔ)。
　　方法：通過(guò)MTT法研究并檢測(cè)了該系列衍生物對(duì)體外培養(yǎng)人結(jié)腸癌SW-480細(xì)胞、胃癌SGC-7901細(xì)胞和乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231的抑制增殖作用，評(píng)價(jià)其對(duì)人結(jié)腸癌、胃癌、乳腺癌細(xì)胞作用的選擇性。同時(shí)采用臺(tái)盼藍(lán)計(jì)數(shù)法觀察活細(xì)胞及死細(xì)胞數(shù)，計(jì)算細(xì)胞存活率，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線，評(píng)價(jià)該系列最佳衍生物對(duì)人腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)

2、抑制作用；AO/EB染色法熒光顯微鏡觀察該系列最佳衍生物誘導(dǎo)人腫瘤細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)改變；應(yīng)用PI染色流式細(xì)胞術(shù)分析檢測(cè)該衍生物誘導(dǎo)人腫瘤細(xì)胞凋亡的程度。
　　結(jié)果：本實(shí)驗(yàn)通過(guò)MTT比色法分析顯示，以結(jié)腸癌SW-480細(xì)胞、乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231和胃癌SGC-7901細(xì)胞為研究對(duì)象，考察了14種白藜蘆醇衍生物的抗腫瘤作用，其結(jié)果表明，在分別作用于結(jié)腸癌細(xì)胞、胃癌細(xì)胞和乳腺癌細(xì)胞24小時(shí)后，14中衍生物對(duì)乳腺癌MDA-MB-2

3、31細(xì)胞均表現(xiàn)出生長(zhǎng)抑制作用，其中y3-6組的抑制作用明顯強(qiáng)于其他白藜蘆醇衍生物組；14種衍生物中大部分對(duì)胃癌表現(xiàn)為生長(zhǎng)抑制作用，但y2-36、y3-1、y3-28、y2-77對(duì)胃癌SGC-7901細(xì)胞表現(xiàn)生長(zhǎng)促進(jìn)作用；14種衍生物中y3-20對(duì)結(jié)腸癌SW-480細(xì)胞表現(xiàn)生長(zhǎng)抑制作用，此外該系列其他藥物均對(duì)結(jié)腸癌表現(xiàn)為生長(zhǎng)促進(jìn)作用。說(shuō)明該系列14種藥物對(duì)人乳腺癌具有較強(qiáng)的抑制效果，對(duì)人胃癌及人結(jié)腸癌效果不佳，且對(duì)不同的腫瘤細(xì)胞具有選擇性

4、。在14種白藜蘆醇衍生物中y3-6的活性明顯強(qiáng)于白藜蘆醇（Res），對(duì)于人乳腺癌細(xì)胞y3-6及白藜蘆醇的IC50值分別為34.39μM及153.74μM。用120μM的y3-6處理人乳腺癌細(xì)胞24小時(shí)，其相對(duì)抑制率達(dá)到78.5％，同濃度下的白藜蘆醇及5-氟尿嘧啶的相對(duì)抑制率為49.36%和79.42%，證明y3-6對(duì)人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231的生長(zhǎng)抑制作用明顯強(qiáng)于白藜蘆醇，與5-氟尿嘧啶作用近似。同濃度下其對(duì)結(jié)腸癌SW-480細(xì)胞

5、為促進(jìn)生長(zhǎng)作用，對(duì)胃癌SGC-7901細(xì)胞的相對(duì)抑制率為26.48%，提示y3-6對(duì)不同的腫瘤細(xì)胞，作用不同。
　　臺(tái)盼藍(lán)細(xì)胞計(jì)數(shù)法表示：將濃度20μM的y3-6、白藜蘆醇、5-氟尿嘧啶分別培養(yǎng)人乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞4天，并繪制生長(zhǎng)曲線。可以觀察到y(tǒng)3-6對(duì)乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用強(qiáng)于白藜蘆醇，且呈時(shí)間依賴性，與5-氟尿嘧啶相當(dāng)。
　　AO/EB染色法表示：以10μM、20μM、40μM濃度的y

6、3-6、白藜蘆醇、5-氟尿嘧啶分別培養(yǎng)人乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞24小時(shí)，置于熒光顯微鏡下觀察，可見(jiàn)不同程度的早期凋亡及晚期凋亡細(xì)胞，凋亡率呈濃度依賴性。y3-6的凋亡率分別為7.06%、8.93%、21.68%，高于白藜蘆醇組。
　　PI染色流式細(xì)胞術(shù)分析表明：y3-6對(duì)乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞的凋亡作用呈濃度依賴性，以10μM、20μM、40μM濃度的y3-6培養(yǎng)乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞24小時(shí)，其凋亡率分別

7、為14.81± 0.86%、15.93±0.09%、33.67±1.15%，同濃度下白藜蘆醇的凋亡率為7.65±0.33%、9.77±0.21%、18.99±0.07%，y3-6的誘導(dǎo)凋亡率均高于同濃度的白藜蘆醇組。
　　結(jié)論：
　　1、14種白藜蘆醇衍生物對(duì)人乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞增殖活性均有抑制作用，其中y3-6抑制作用最強(qiáng)，其機(jī)制可能與y3-6誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡有關(guān)。
　　2、14種白藜蘆醇衍生物