白藜蘆醇及其衍生物的抑菌活性及對番茄早疫病菌的作用機理研究.pdf

1、植物源殺菌劑因作用廣譜、資源豐富、可再生、與環(huán)境相容性好等優(yōu)點成為農(nóng)藥研究領(lǐng)域的熱點，目前人們已發(fā)現(xiàn)了很多具有抑菌、殺菌活性的植物種類，且分離出的活性物質(zhì)涉及酚類、萜類、黃酮類等化合物。芪類化合物便是眾多植物源活性成分中的一種，具有一定的抑菌活性，白藜蘆醇是該類化合物的典型代表。研究表明，白藜蘆醇具有豐富的生物學(xué)活性和藥理作用，但在農(nóng)業(yè)方面的研究相對較少，為了明確芪類化合物在農(nóng)業(yè)病害中的防治前景，為該類化合物的深入研究提供探索依據(jù)，本論

2、文選擇白藜蘆醇及其衍生物為研究對象，明確了其對供試病原真菌在離體、活體條件下的毒力，初步探討了其作用機理及毒力穩(wěn)定性，并測定了與其它殺菌劑混用的聯(lián)合毒力，主要結(jié)果如下：
　　 1.白藜蘆醇及其衍生物抑菌譜測定結(jié)果：5個供試化合物對9類植物上的6種供試病原真菌均有一定的抑制作用，其中3，5-二羥基-4’-甲氧基二苯乙烯(Ⅲ)的活性最高，其對番茄早疫病菌菌絲生長的抑制效果亦為最好，EC50為3.31μg/mL，對蘋果霉心病菌次之，E

3、C50為18.53μg/mL，對蘋果炭疽病菌最差，EC50僅為87.50μg/mL。5個化合物均對番茄早疫病菌呈現(xiàn)出較高的抑制活性，EC50值在3.31～32.96μg/mL之間，對番茄灰霉病菌的EC50在18.58～49.83μg/mL之間，對其余原真菌的抑制活性各不相同，無明顯規(guī)律。
　　 2.測定了抑菌活性最高的3，5-二羥基-4’-甲氧基二苯乙烯對番茄灰霉病菌生物學(xué)性狀的影響，其中對產(chǎn)孢的抑制活性最高，12.5μg/mL

4、下產(chǎn)孢抑制率即達到了67.96％，200μg/mL下幾乎沒有孢子產(chǎn)生；菌絲生長量和孢子萌發(fā)的EC50值分別為32.7070μg/mL、48.3867μg/mL；菌核是該菌株最耐藥的營養(yǎng)體，菌核萌發(fā)的EC50值為77.2078μg/mL，但菌核生成數(shù)量及重量與藥劑濃度無明顯的正相關(guān)關(guān)系。
　　 3.白藜蘆醇對番茄早疫病菌的離體活性測定結(jié)果：包括白藜蘆醇在內(nèi)的5種供試藥劑中，異菌脲對番茄早疫病菌的抑制活性最高，EC50為1.1196

5、μg/mL，其活性是白藜蘆醇的40.5倍，活性最低的是多菌靈，EC50為51.4314μg/mL。白藜蘆醇對菌絲生長表現(xiàn)為抑菌作用，導(dǎo)致了菌絲的畸形，100μg/mL的菌絲干重抑制率達到65.0％，抑制50％菌絲生長的濃度為40.0039μg/mL；白藜蘆醇200μg/mL對孢子萌發(fā)的抑制率為69.70％，EC50為113.7339μg/mL，代森錳鋅對番茄早疫病菌孢子萌發(fā)的抑制活性遠遠高于白藜蘆醇，其濃度為0.5μg/mL時，孢子萌發(fā)

6、抑制率就達到了86.59％，兩種藥劑均未對孢子形態(tài)造成影響。
　　 4.活體條件下白藜蘆醇對番茄早疫病菌的活性測定結(jié)果：采用接種菌餅的葉片法和接種孢子的溫室盆栽法進行毒力測定。先用白藜蘆醇處理后接種的情況下，葉片上的病斑直徑或病情指數(shù)隨著白藜蘆醇濃度的增大有所減弱，葉片法中0～1000μg/mL白藜蘆醇的防治效果分布于8.14～60.31％，EC50為661.7178μg/mL；溫室盆栽法中白藜蘆醇的濃度設(shè)置為0～5000μg/

7、mL，100μg/mL的防治效果為15.33％，5000μg/mL的防治效果僅為54.56％，由此可見，葉片法的防效略高于盆栽法。先進行接種，后用白藜蘆醇處理，兩種方法的防治效果均不理想。
　　 5.測定了白藜蘆醇對番茄早疫病菌菌絲體細胞膜通透性、可溶性蛋白和DNA生成的影響。試驗結(jié)果顯示，包括對照在內(nèi)，番茄早疫病菌菌絲的電導(dǎo)率均隨著處理時間的推移而升高，白藜蘆醇能夠增加菌絲細胞膜的通透性，導(dǎo)致電解質(zhì)滲漏，200μg/mL處理1

8、80min后，電導(dǎo)率的增加幅度達到了218.2％。經(jīng)白藜蘆醇處理7d后，番茄早疫病菌菌絲體內(nèi)可溶性蛋白含量較對照有所下降，隨著處理濃度的增大，蛋白含量有所減少，100μg/mL時，蛋白含量為0.709mg/g，抑制率達到了70.00％，但在在設(shè)定的劑量范圍內(nèi)，白藜蘆醇未能抑制番茄早疫病菌菌絲體內(nèi)DNA的合成。
　　 6.pH值和紫外線能夠影響白藜蘆醇的活性，在pH值為6的情況下白藜蘆醇對菌絲生長和孢子萌發(fā)的抑制作用最明顯，此時2

9、0μg/mL鮮重抑制率為12.01％，干重抑制率為30.42％，50μg/mL孢子萌發(fā)抑制率為3.24％，顯著高于其他處理；隨著紫外線照射時間的延長，番茄早疫病菌的菌落直徑逐漸增大，由照射0.5h的2.60cm增大到照射4h時的3.40cm。溫度能夠引起白藜蘆醇微弱的降解，避光保存8d，4℃、25℃、35℃的降解率分別為1.43％、2.05％、5.60％。
　　 7.白藜蘆醇與代森錳鋅、異菌脲混用表現(xiàn)出了一定的增效作用，而與多菌

10、靈、百菌清混用則具有拮抗作用。其中，白藜蘆醇與代森錳鋅混用的增效作用最顯著，在試驗配比下，代森錳鋅：白藜蘆醇=7:1的增效作用最好，EC50值為2.2790μg/mL，共毒系數(shù)為863.93，1:7的EC50值為21.2359μg/mL，共毒系數(shù)為172.34，亦為增效作用；異菌脲與白藜蘆醇在1:7和7:1時表現(xiàn)出微弱的增效作用，EC50值分別為5.6331μg/mL、1.0194μg/mL，共毒系數(shù)分別為134.35、125.05，其