抗CD3ε單克隆抗體和5-氟尿嘧啶對T淋巴細胞凋亡的協(xié)同作用.pdf

1、該研究首先發(fā)現(xiàn)采用預(yù)包被抗CD8抗體對JK、TJK和T3JK細胞進行34小時刺激后,僅有TJK細胞出現(xiàn)凋亡,使胞內(nèi)caspase-3由未活化的形式生成活化的小片段,并有底物催化活性;伴隨TJK的細胞凋亡,其p53的表達顯著升高,而JK、T3JK細胞中則保持很低的水平,首次證明p53參與了TCR/CD3介導(dǎo)的T淋巴細胞凋亡信號途徑的調(diào)節(jié);同時發(fā)現(xiàn)Bcl-2蛋白家族成員Bid在抗CD8抗體刺激的TJK細胞凋亡時被活化,形成截短的tBid(t

2、runcated Bid),這種現(xiàn)象的發(fā)生一般和線粒體途徑相關(guān),因此該實驗提示Bcl-2蛋白家族和線粒體可能參與了TCR/CD3介導(dǎo)的T淋巴白血病細胞凋亡的信號傳遞.由于TJK細胞中CD3ε-ITAM是完整的,JK、T3JK細胞中CD3ε-ITAM發(fā)生了突變,表明上述結(jié)果與CD3ε-ITAM的完整性相關(guān),CD3ε-ITAM中的兩個酪氨酸在TCRP/CD3介導(dǎo)的信號傳遞中起關(guān)鍵作用,為進一步研究TCR/CD3復(fù)合物介導(dǎo)的細胞凋亡途徑及分子

3、機制奠定了基礎(chǔ).該研究首次發(fā)現(xiàn)抗CD8單克隆抗體和5-氟尿嘧啶在刺激T淋巴白血病細胞凋亡時出現(xiàn)相似的細胞內(nèi)效應(yīng),有相同的蛋白因子參與,提示二者在引起T淋巴白血病細胞凋亡的過程中可能具有協(xié)同作用,這一工作假設(shè)得到了進一步的實驗支持.我們將二者聯(lián)用刺激上述3株T淋巴白血病細胞株,結(jié)果表明二者聯(lián)用比單獨使用抗CD8抗體或5-FU時,細胞凋亡率、p53和NFκB表達、caspase-3和Bid活化等均顯著提高;使用caspase全抑制劑、cas

4、pase-3抑制劑、caspase-8抑制劑和caspase-9抑制劑都可以抑制抗CD8單體和5-氟尿嘧啶聯(lián)用引起的細胞凋亡,使細胞存活率增加,說明除了caspase-3外,caspase-8,-9等也參與了此凋亡信號傳遞途徑.該項研究表明抗CD8單克隆抗體和5-氟尿嘧啶在誘導(dǎo)T淋巴白血病細胞凋亡時具有協(xié)同作用,TCR/CD3抗原受體復(fù)合物介導(dǎo)的信號途徑與化學(xué)藥物介導(dǎo)的信號途徑中存在交叉點(Cross Talk)或共同通路,在理論上為進