近紅外-紅區(qū)染料及膠體氯化銀散射光在生物大分子測定中的應(yīng)用.pdf

1、廈門大學(xué)博士學(xué)位論文近紅外-紅區(qū)染料及膠體氯化銀散射光在生物大分子測定中的應(yīng)用姓名：鄭洪申請學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：分析化學(xué)指導(dǎo)教師：許金鉤1999.10.1塑要! 壘! 竺!．該染料分子在水溶液中于7 7 6 n l n 處有一最大吸收峰。在酸性條件下，該吸收峰隨著蛋白濃度的增大而呈減色效應(yīng)。 吸光度的減少與加入的蛋白濃度在一定范圍內(nèi)呈線性關(guān)系。文中對(duì)體系的酸度、溫育時(shí)間、花菁染料濃度等各種影響因素進(jìn)行實(shí)驗(yàn)和討論。結(jié)果表明，該法能夠應(yīng)用于

2、血清總蛋白的測定，因而建立了染料結(jié)合法在近紅外區(qū)以分光光度法測定血清蛋白質(zhì)的新方法． 該法并用于實(shí)際血清樣品的測定，能有效消除生物樣品背景吸收的干擾．其次合成了一個(gè)陽離子七次甲基花菁，其結(jié)構(gòu)如下所示：該染料在水溶液中于7 7 1n n l 處有一最大吸收峰． 該吸收峰隨著溶液中核酸濃度的增大而星減色效應(yīng)，同時(shí)，在6 4 0n m 處呈現(xiàn)增色效應(yīng)． 為提高測定靈敏度及減少背景干擾的影響，選擇7 7 IE L m 作為測定波長． 文中對(duì)各種

3、影響因素如酸度、染料用量、溫育時(shí)間及試劑加入順序進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)，優(yōu)化了實(shí)驗(yàn)條件，首次建立了在近紅外區(qū)對(duì)核酸進(jìn)行常規(guī)分光光度測定的新方法，該法簡單、靈敏，可有效避免生物樣品引入的背景吸收干擾．●第三章，研究了陰離子型近紅外花菁染料在C T A B 存在下的熒光反應(yīng)，結(jié)果表明，在適量C T A B 存在下，花菁的熒光被強(qiáng)烈猝滅．據(jù)此，建立了近紅外熒光增強(qiáng)法測定生物大分子的方法。 本章分為兩部分．“首先，在上述弱熒光的花菁一C T A B 體系中