基于2-疊氮甲基芳基甲酸酯熒光探針的合成及應(yīng)用.pdf

1、硫化氫是繼一氧化碳和一氧化氮之后被證實(shí)的第三個(gè)內(nèi)源性氣體信號(hào)分子，在生物體病理和生理等方面發(fā)揮著重要作用。過(guò)氧化氫作為一種重要的氧化物，在維持生物體正常生命活動(dòng)過(guò)程中扮演著重要角色。因此，在生物體中對(duì)它們的追蹤和監(jiān)測(cè)具有重要意義。相比傳統(tǒng)檢測(cè)方法，熒光光譜法具有高靈敏度、高選擇性并能實(shí)現(xiàn)原位檢測(cè)等優(yōu)點(diǎn)。因此，設(shè)計(jì)與合成檢測(cè)細(xì)胞中硫化氫和過(guò)氧化氫的新型熒光分子探針具有重要意義。
　　本文針對(duì)傳統(tǒng)硫化氫熒光探針選擇性差、靈敏度低及響應(yīng)

2、速度慢的問(wèn)題，基于硫化氫可將2-(疊氮甲基)-4-(硝基)苯甲酸酯的疊氮還原并發(fā)生分子內(nèi)反應(yīng)釋放熒光團(tuán)的原理，以Rhodol為熒光團(tuán)合成了新型硫化氫探針ANR。ANR對(duì)硫化氫具有優(yōu)異的選擇性，響應(yīng)迅速，4分鐘內(nèi)即可達(dá)到滿意的熒光強(qiáng)度；ANR對(duì)硫化氫濃度具有很高的靈敏度，檢測(cè)限低至0.4327μM。MTT法表明探針ANR對(duì)細(xì)胞幾乎沒(méi)有毒性，探針在細(xì)胞中對(duì)硫化氫良好的成像作用證明ANR可以成為一種性能優(yōu)異的生物體內(nèi)H2S熒光探針。
　

3、　在測(cè)試工作中，我們發(fā)現(xiàn)由7-Cl-Rhodol與2-(疊氮甲基)苯甲酸合成的分子ACR對(duì)硫化氫沒(méi)有響應(yīng)，而對(duì)過(guò)氧化氫具有優(yōu)異的選擇性。進(jìn)一步測(cè)試顯示，ACR對(duì)過(guò)氧化氫響應(yīng)迅速，靈敏度高，具有優(yōu)異的抗干擾性。探針ACR具有較低的細(xì)胞毒性，在細(xì)胞中對(duì)過(guò)氧化氫的良好成像表明，ACR可以很好的應(yīng)用于生物體內(nèi)過(guò)氧化氫的測(cè)試。
　　基于對(duì)ACR的研究，我們以2’,7’-二氯Rhodol和2-(疊氮甲基)苯甲酸合成了另一種過(guò)氧化氫熒光探針AC

4、F。ACF對(duì)過(guò)氧化氫響應(yīng)非常迅速，5分鐘時(shí)熒光強(qiáng)度已達(dá)到118倍；ACF對(duì)過(guò)氧化氫有著優(yōu)異的選擇性和抗干擾性，檢測(cè)限低至6.5 nM，靈敏度很高；ACF可以對(duì)濃度為50-400μm濃度的過(guò)氧化氫進(jìn)行定性甚至定量的檢測(cè)。ACF對(duì)細(xì)胞幾乎沒(méi)有毒性，探針在細(xì)胞中對(duì)過(guò)氧化氫響應(yīng)迅速，成像良好，可以作為一種性能優(yōu)異的內(nèi)源性過(guò)氧化氫熒光探針投入應(yīng)用。
　　本論文以2-疊氮甲基芳基甲酸酯為新型反應(yīng)位點(diǎn)，設(shè)計(jì)合成了硫化氫熒光探針ANR、過(guò)氧化氫熒