蘋果優(yōu)良砧木、品種高效再生體系的建立及脫毒技術初探.pdf

1、蘋果是我國第一大栽培果樹，目前我國果園老化，急待更新，栽培模式面臨著從喬砧稀植向矮砧集約密植轉化，優(yōu)良的蘋果矮化砧木供不應求，限制了新栽培模式的發(fā)展，本研究建立了M9T337和抗重茬1號兩種矮化砧木及優(yōu)良品種‘煙富8號’的高效再生體系，解決了市場上矮化砧木苗木匱乏的問題，加速矮化集約密植栽培模式的推廣。
　　蘋果品種和砧木的病毒病影響蘋果的產(chǎn)量、品質及樹勢，影響蘋果整個產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。本研究以‘煙富8號’和‘鑫園’為試材，研究了蘋果苗

2、木脫毒及病毒檢測方法。
　　主要結論如下：
　　1.以MS為基本培養(yǎng)基，研究蘋果矮化砧木M9T337、抗重茬1號和優(yōu)良品種‘煙富8號’的初代培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、和生根培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基及馴化移栽的最佳方法。結果表明：（1）在初代培養(yǎng)時，3種材料的新梢的最佳培養(yǎng)基均為 MS+6-BA0.5 mg/L+IBA0.1 mg/L。培養(yǎng)基中附加1.5g/L PVP，能顯著降低外植體的褐化率并顯著提高外置體的成活率。（2）增殖培養(yǎng)時，3個材料

3、在附加6-BA1.0mg/L時，增殖系數(shù)最高，而3種試材最適的IBA濃度不同。砧木M9T337的最佳增殖培養(yǎng)基為MS+6BA1.0 mg/L+IBA0.1 mg/L+GA30.1mg/L，增殖系數(shù)為5.17；砧木抗重茬1號的最佳增殖培養(yǎng)基為 MS+6BA1.0 mg/L+IBA0.5 mg/L，增殖系數(shù)為4.31；品種‘煙富8號’的最佳增殖培養(yǎng)基為MS+6BA1.0 mg/L+IBA0.3 mg/L，增殖系數(shù)為5.27。（3）研究發(fā)現(xiàn)在

4、生根培養(yǎng)基的篩選中，IBA處理濃度對M9T337及‘煙富8號’的生根影響均表現(xiàn)為，隨著IBA濃度的增加，生根率先增加后會下降。砧木M9T337的最佳生根培養(yǎng)基為：1/2 MS+IBA0.8 mg/L，‘煙富8號’最佳生根培養(yǎng)基：為1/2MS+IBA0.6 mg/L。（4）M9T337及‘煙富8號’馴化移栽時所用最佳基質為：草炭土+蛭石+珍珠巖（3:1:1），其中M9T337的移栽成活率76.41％，‘煙富8號’的移栽成活率為86.54%

5、。
　　此外，在M9T337快繁體系建立中，組培苗的玻璃化和簇生問題極為嚴重，影響組培進程的建立。通過研究發(fā)現(xiàn)附加GA3可以很好的解決組培苗玻璃化和簇生問題。得出了更加適合 M9T337組培苗增殖增殖的配方，即 MS+6BA1.0 mg/L+ IBA0.1 mg/L+GA30.1 mg/L+瓊脂7 g/L；
　　2.研究了蘋果病毒病檢測的方法,用試劑盒法提取RNA以及反轉錄,該法操作簡單,只需要3-4個小時。參考中農(nóng)的蘋果潛

6、隱性病毒引物，結合西南大學PCR反應體系，快速檢測蘋果病毒病。此檢測方法可在一天檢測出蘋果病毒，快速、高效、靈敏度高。
　　3.本研究以‘煙富8號’號及‘鑫園’蘋果組培苗為試材，經(jīng)過42℃、16 h光照/34℃8 h黑暗下熱處理，選取了熱處理25 d、32 d、39 d、46 d和53 d后的材料，分別取其莖尖，切取莖尖生長點，并對生長點進行快繁和蘋果褪綠葉斑病毒（ACLSV）、蘋果莖溝病毒（ASGV）、蘋果莖痘病毒（ASPV）病