深綠木霉菌株D16和S361的次生代謝產(chǎn)物研究.pdf

1、植物內(nèi)生真菌是指在生活史中的某一個(gè)階段存在于健康植物組織內(nèi)部，不會引起宿主明顯病癥或者對宿主造成明顯傷害的真菌。
　　丹參是雙子葉植物唇形科鼠尾草屬多年生直立草本植物，是一種常用的藥用植物，具有活血祛瘀，通經(jīng)止痛，清心除煩，涼血消癰之功效;三尖杉是一種常綠喬木，亞熱帶特有植物，產(chǎn)于浙江、安徽南部、福建、江西、湖南等省區(qū)，具有驅(qū)蟲，消積，抗癌的功能，用于治療咳嗽，食積，蛔蟲、鉤蟲病。而次生代謝產(chǎn)物是指某些微生物生長到穩(wěn)定期前后，以結(jié)

2、構(gòu)簡單、代謝途徑明確、產(chǎn)量較大的初生代謝物為前體，通過復(fù)雜的次生代謝途徑所合成的各種結(jié)構(gòu)復(fù)雜的化合物。目前大量的研究表明內(nèi)生真菌次生代謝產(chǎn)物種類豐富、結(jié)構(gòu)新穎、生物活性多樣，是一座為人類提供生物活性物質(zhì)的寶庫。本課題組致力于藥用植物內(nèi)生真菌生物多樣性、化學(xué)多樣性和宿主相關(guān)性的研究。在前期研究中，課題組從丹參和三尖杉中分別分離并鑒定出了深綠木霉菌，分別編號為D16和S361，其中D16能產(chǎn)生丹參酮Ⅰ和丹參酮ⅡA，而在S361次生代謝產(chǎn)物中

3、并沒有發(fā)現(xiàn)丹參酮類的物質(zhì)。查閱文獻(xiàn)后發(fā)現(xiàn)，有報(bào)道顯示在不同宿主中生長的其它屬的同種內(nèi)生真菌能產(chǎn)生和宿主活性成分類似的次生代謝產(chǎn)物，猜想在D16和S361的次生代謝產(chǎn)物中是否也會出現(xiàn)類似的現(xiàn)象。
　　本文對分離自浙江省建德市三尖杉的深綠木霉菌株(Trichoderma atroviride S361)和分離自陜西商洛丹參的深綠木霉菌株(Trichoderma atroviride D16)進(jìn)行了系統(tǒng)的次生代謝產(chǎn)物及其生物學(xué)活性研究。

4、
　　采用大米培養(yǎng)基對D16菌株進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，采用硅膠柱色譜、ODS柱色譜、Sephadex LH-20凝膠柱色譜、半制備高效液相色譜等方法對其發(fā)酵培養(yǎng)物中的次生代謝產(chǎn)物進(jìn)行分離純化，采用各種波譜數(shù)據(jù)(NMR，MS，IR，CD)以及文獻(xiàn)對照等手段進(jìn)行鑒定，共分離鑒定化合物17個(gè)，包括3個(gè)新化合物（3個(gè)倍半萜類的化合物）和14個(gè)已知化合物（包括了5個(gè)酯類化合物，2個(gè)酸類化合物，1個(gè)酚類化合物，1個(gè)醇類化合物，1個(gè)酮類化合物，3個(gè)倍半

5、萜的化合物，1個(gè)二萜類化合物）。
　　采用大米培養(yǎng)基對S361菌株進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，采用硅膠柱色譜、OD柱色譜、Sephadex LH-20凝膠柱色譜、半制備高效液相色譜儀等方法對其發(fā)酵培養(yǎng)物中的次生代謝產(chǎn)物進(jìn)行分離純化，采用各種波譜數(shù)據(jù)(NMR，MS，IR，CD)以及文獻(xiàn)對照等手段進(jìn)行鑒定，共分離鑒定化合物16個(gè)，包括4個(gè)新化合物（2個(gè)酰胺類的化合物，1個(gè)倍半萜類的化合物，1個(gè)二萜類的化合物）和12個(gè)已知化合物（包括了3個(gè)內(nèi)脂類的化