組織蛋白酶D在苦參堿誘導JM細胞Type Ⅱ Cell Death中的作用及其在濾泡型淋巴瘤和淋巴濾泡過度增生中的表達研究.pdf

1、白血病是嚴重危害人類健康與生命的疾病,發(fā)病率在中國為 3~4/10萬人口.其中,T淋巴母細胞白血病發(fā)病急,惡性程度高,嚴重危害青少年的生命.誘導白血病細胞凋亡是治療白血病的新策略之一.但目前所用誘導劑多為重金屬制劑,毒性大,難以堅持使用.因此尋找低毒高效的白血病細胞凋亡誘導劑尤顯迫切.苦參堿是一種從中藥苦參中提取的生物堿.以往的研究發(fā)現(xiàn)苦參堿可以誘導肝癌細胞凋亡,也可以誘導髓系K562細胞分化和凋亡.JM為急性T淋巴母細胞白血病細胞株.

2、我們的初步研究發(fā)現(xiàn)苦參堿可以抑制JM細胞的DNA合成,造成G1期阻滯,從而抑制JM細胞的增殖,同時,該生物堿還可誘導JM細胞株發(fā)生PCD.進一步研究發(fā)現(xiàn),當加藥后24小時,光鏡、透射電鏡下可見JM細胞漿有大量空泡.隨處理時間延長至第4天,可見呈"凋亡"形態(tài)學改變的細胞:染色質(zhì)濃縮、邊集,可見"凋亡"小體結構.這種形態(tài)學改變過程與Type II Cell Death較為一致.近來有文獻報道,組織蛋白酶家族的一些成員,如B、D、L等在不同的

3、Type II Cell Death模型中起重要作用,但其信號傳導的分子機理仍不清楚.我們認為,cathepsinD在苦參堿誘導JM細胞發(fā)生TypeIICell Death的信號傳遞中所起的作用是必需的.藥物處理后,cathepsinD在轉錄和表達水平上調(diào),cathepsinD前體形式蓄積.JM細胞發(fā)生Type II Cell Death,不僅與cathepsinD相關,而且可能與cathepsinD在核內(nèi)的重新分布有關.苦參堿誘導JM

4、細胞發(fā)生的Type II Cell Death,可能是通過Fas/Fas-1這一死亡途徑實現(xiàn)的,細胞內(nèi)cathepsinD表達的上調(diào)發(fā)生在激活Fas/Fas-L死亡程序之前.cathepsinD在T淋巴母細胞白血病JM細胞株的Type II Cell Death中表達上調(diào),那么其在B淋巴細胞及其起源的疾病中的表達情況如何呢?因此,我們也檢測了cathepsin D在濾泡型淋巴瘤(FL)和淋巴濾泡過度增生(FH)的生發(fā)中心的表達.我們用免

5、疫組化LSAB法,檢測了10例FL,9例FH淋巴結石蠟標本中cathepsin D的表達情況,發(fā)現(xiàn)在10例FL標本中,cathepsin D陽性信號較弱,位于瘤性濾泡生發(fā)中心樹突狀細胞漿內(nèi).濾泡中心部分的陽性細胞數(shù)目少,而靠近邊緣部位較多.所有病例的濾泡生發(fā)中心瘤細胞cathepsin D表達陰性.在9例FH標本中,胞漿染色陽勝的樹突狀細胞均勻彌散地分節(jié)于生發(fā)中心,陽性信號比FL組強,而濾泡內(nèi)其他細胞均為陰性.有4例FL的瘤性生發(fā)中心被

6、殘存的套區(qū)細胞包繞,這些被包繞的生發(fā)中心內(nèi)陽性細胞數(shù)目較其他6例FL無套區(qū)細胞包繞的生發(fā)中心內(nèi)陽性細胞數(shù)目多.在部分無套區(qū)細胞包繞的生發(fā)中心內(nèi),cathepsin D陽性染色細胞甚至缺如.因此,我們認為:cathepsin D可作為一種淋巴結濾泡樹突狀細胞良好的標志物.cathepsin D在FL瘤性濾泡和在FH濾泡中樹突狀細胞中的差異表達,可作為一項鑒別兩種疾病的指標.在FL瘤性濾泡中cathepsin D陽性樹突狀細胞的減少,可能與