中藥活性成分重樓皂苷Ⅵ抑制肺鱗癌細(xì)胞增殖的機(jī)制研究.pdf

1、目的:
　　中藥重樓皂苷(rhizoma paridis saponins)來(lái)源于七葉一枝花Paris polyphylla Smith var.chinensis(Franch.)Hara或百合科植物云南重樓Paris polyphylla Smith var.yunnanensis(Franch.)Hand.-Mazz.的根莖。人們發(fā)現(xiàn)從增殖、凋亡、生長(zhǎng)、分化等等環(huán)節(jié)重樓皂苷能從機(jī)制上達(dá)到抑制腫瘤的作用，所以被認(rèn)為藥物活性成分

2、中含有抗惡性腫瘤成分。但是它以怎樣的分子途徑來(lái)達(dá)到阻滯腫瘤細(xì)胞增殖，促進(jìn)其凋亡的作用還不清楚。
　　本研究以人肺鱗癌的細(xì)胞為模，觀察PolyphyllinⅥ對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的阻滯;分析PolyphyllinⅥ對(duì)細(xì)胞凋亡率及凋亡相關(guān)蛋白的影響，探討PolyphyllinⅥ抑制肺鱗癌細(xì)胞增殖的分子機(jī)制。
　　方法:
　　體外培育人肺鱗癌H226和H520細(xì)胞，MTT分析多種濃度PolyphyllinⅥ作用24、48和72h后的增

3、殖改變;流式細(xì)胞術(shù)分析PolyphyllinⅥ對(duì)細(xì)胞凋亡率的影響，免疫印跡實(shí)驗(yàn)分析線粒體凋亡途徑的蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　PolyphyllinⅥ對(duì)H226和H520細(xì)胞的增殖改變呈劑量-時(shí)間依賴，不同濃度(0.5、1、2.5、5和10μM)PolyphyllinⅥ干預(yù)24h，H226細(xì)胞的存活率分別為94.1％±5.6％、62.3％±3.7％、54.7％±4.7％、10.5％±2.6％、8.5％±2.7％;干預(yù)48h，

4、存活率分別為88.1％±5.3％、35.2％±4.0％、14.7％±3.2％和11.6％±3.8％、13.4％±2.1％;干預(yù)72h，存活率分別為85.1％±6.0％、18.3％±3.1％、14.5％±4.3％和12.3％±2.4％、8.6％±1.3％;H520細(xì)胞的存活率分別為93.8％±4.7％、76.7％±3.9％、48.5％±4.9％、18.2％±3.0％、9.6％±2.1％;干預(yù)48h，存活率分別為91.3％±4.2％、42.

5、5％±5.1％、21.3％±3.8％和10.8％±2.2％、12.6％±3.4％;干預(yù)72h，存活率分別為87.1％±6.4％、34.8％±4.2％、9.2％±3.7％和11.4％±2.4％、9.9％±1.8％。Annexin V-FITC/PI雙染結(jié)果顯示，2.5、5和10μM的PolyphyllinⅥ作用H226細(xì)胞24h的凋亡率分別為32.3％、83.5％和97.0％，隨PolyphyllinⅥ濃度逐漸提高，剪切型凋亡標(biāo)志蛋白ca