重樓皂苷Ⅰ對肝癌細(xì)胞Bel-7402生長抑制作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、重樓(Rhizoma Paridis),又稱七葉一枝花,是百合科重樓屬植物的泛稱,以蚤休之名首載于《神農(nóng)本草經(jīng)》。中藥重樓是重樓屬植物的干燥根莖,主要分布在我國西南各省,它的藥用歷史悠久,具有清熱解毒、消腫止痛、涼肝定驚等功效。用于癰瘡、毒蛇咬傷、跌打傷痛、涼風(fēng)抽搐等癥。近年來隨著研究的深入,重樓的藥用價(jià)值日益被重視。但目前對重樓屬植物的研究報(bào)道不多,主要集中在資源、生藥學(xué)和化學(xué)及藥理學(xué)等方面。
　　 目的：研究從重樓植物中提取

2、的活性成分重樓皂苷I,觀察其體外抗肝癌細(xì)胞Be1-7402增殖的效果并初步探討其可能的相關(guān)作用機(jī)制。
　　 方法：以不同濃度的重樓皂苷I作用于肝癌細(xì)胞Be1-7402,不同時(shí)間后用MTT比色法檢測細(xì)胞增殖程度；光鏡下觀察藥物作用后細(xì)胞形態(tài)的變化；以1.25μg/ml的重樓皂苷I處理肝癌Be1-7402細(xì)胞,經(jīng)碘化丙啶(PI)染色后應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測細(xì)胞凋亡情況；DNA凝膠電泳觀察細(xì)胞凋亡情況；運(yùn)用免疫細(xì)胞化學(xué)染色檢測藥

3、物作用后肝癌細(xì)胞Bel-7402的Bax、Bc1-2和Caspase-3蛋白表達(dá)情況。
　　 結(jié)果：重樓皂苷I在0.3125-5μg/ml濃度范圍內(nèi)對Bel-7402細(xì)胞的增殖均有抑制作用,并呈現(xiàn)出明顯的時(shí)間劑量依賴效應(yīng)關(guān)系。重樓皂苷I能誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡,流式檢測在濃度為1.25μg/ml作用12h、24h、48h后,均可出現(xiàn)明顯的凋亡峰,作用時(shí)間越長,凋亡率越高；DNA凝膠電泳可見DNA斷裂片段明顯增多；濃度為1.25μg/m