溶血對氧化酶法測定葡萄糖的影響與糾正.pdf

1、目的：溶血發(fā)生時,為避免重新采血對患者的損傷,選用血漿游離血紅蛋白濃度來衡量溶血程度標準,采用雙波長法測定葡萄糖濃度,并探討溶血對葡萄糖氧化酶法測定血糖的干擾與糾正方法。
　　 方法：溶血對于血糖測定的多因素干擾中血紅蛋白的影響最為顯著,對于血糖測定可以選用血漿游離血紅蛋白濃度來衡量溶血程度標準,即溶血后血糖值與血漿游離血紅蛋白濃度呈一定關系。選用健康人血液標本,要求無黃疸、無溶血、無脂血。按美國臨床和實驗室標準研究院(CLSI

2、)文件配制不同濃度的血紅蛋白溶液,建立低濃度、中濃度、高濃度三種溶血程度的反應體系,與血漿及葡萄糖校準液按一定比例混合制成溶血樣本,在UV-VIS8500紫外/可見分光光度計200nm-650nm波長范圍內(nèi)掃描,得到兩條A-λ曲線,進行疊加比較,選擇主波長及副波長。使用葡萄糖氧化酶法及雙波長法對溶血前和溶血后標本進行測定,可以得到3個參數(shù):不同的溶血程度(X)、葡萄糖的氧化酶法測定濃度(Y)、葡萄糖的真實濃度(Z),利用SPSS13.0

3、進行二元一次回歸與統(tǒng)計學分析,再比較經(jīng)回歸糾正前后的相對偏差,考察偏差是否在允許范圍內(nèi)。根據(jù)美國CL1A'88能力比對檢驗的葡萄糖分析質量要求的相對偏差在允許范圍的±10％以內(nèi)判斷為可接受,比較經(jīng)回歸＜糾正前后的相對偏差,考察是否在允許范圍內(nèi)。對樣本溶血糾正前后的數(shù)據(jù)進行配對t檢驗,觀察糾正效果。
　　 結果：溶血樣本的葡萄糖測定值較真實值偏低。隨著溶血程度的加深,干擾越明顯?？偟幕貧w方程為Z=0.416+0.054X+1.01

4、5Y,相關系數(shù)r=0.974(P＜0.01)。在經(jīng)回歸糾正前后的相對偏差分別為13.4%、7.7%(P＞0.01),糾正后在允許范圍(10%)之內(nèi)。
　　 結論：溶血對氧化酶法測定葡萄糖的干擾比較復雜,主要有三個方面:①血紅蛋白:紅細胞破裂后釋放的血紅蛋白吸收光譜與氧化酶法部分重疊,表現(xiàn)為正干擾。同時,血紅蛋白的含鐵血紅素具有擬過氧化物酶的活性,也能催化酚、4-氨基安替比林(4-AAP)反應,生成紅色醌亞胺,表現(xiàn)為正干擾。②谷胱