PCR引發(fā)的mtDNAD環(huán)重復區(qū)假異質(zhì)性及其機制的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本文采用了PCR方法,研究了藍狐(Alopexlagopus)、黑熊(Selenarctosthibetanus)、棕熊(Ursusarctos)、狗(Canisfamiliaris)、狼(Canislupus)、虎(Panheratigris)的相應區(qū)域。結(jié)果顯示,在藍狐、黑熊、棕熊、狗和狼,無論以總DNA為模板,還是以PAGE電泳純化的擴增產(chǎn)物或克隆質(zhì)粒為模板,擴增產(chǎn)物在8%PAGE膠上都表現(xiàn)為梯狀譜帶,相鄰條帶之間相差1個重復單位

2、。說明這種梯狀譜帶是一種PCR引發(fā)的假異質(zhì)性。進一步研究顯示,這種假異質(zhì)性與引物無關,在一定程度上受DNA聚合酶種類的影響,但不能被消除?;⒃谏鲜鰧嶒炛芯怀霈F(xiàn)梯狀譜帶。通過RNAstructurev3.7軟件對上述物種重復區(qū)序列的結(jié)構(gòu)進行分析發(fā)現(xiàn),不同的重復序列可以產(chǎn)生不同的周期性二級結(jié)構(gòu),當新鏈延伸到達這樣的結(jié)構(gòu)時,DNA聚合酶就有可能與該高級結(jié)構(gòu)的雙鏈位置結(jié)合,而新生鏈起到引物作用,使聚合酶有機會將鏈的延伸越過一個或幾個重復單位,

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