CHIP和Hsp90在活性氧調(diào)控SENP3穩(wěn)定性中的作用.pdf

1、SUMO特異性蛋白酶SENP3是SUMO特異性蛋白酶家族中的一個重要成員,它對一系列特異底物的去SUMO化與細胞很多重要的生理功能密切相關(guān),例如細胞增殖,細胞衰老,缺氧反應(yīng)等等。但是到目前為止,對SENP3自身的調(diào)控卻知之甚少。我們實驗室在前期的研究中發(fā)現(xiàn),細胞遭遇輕度的刺激,活性氧升高后,SENP3蛋白泛素化降解減慢,穩(wěn)定性增強,能持續(xù)發(fā)揮其活性。本研究旨在探索這一現(xiàn)象背后的調(diào)控機制,從而深入理解活性氧作為信號分子在細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)上游的

2、重要角色。
　　 CHIP(carboxy terminus of Hsc70s-interacting protein)是一個具有E3連接酶功能的共伴侶分子。通過篩選我們發(fā)現(xiàn),在細胞靜息狀態(tài)下CHIP和SENP3能夠特異性結(jié)合。抑制CHIP可以使SENP3蛋白穩(wěn)定,而過表達則促進了SENP3的降解。因此CHIP作為E3連接酶介導(dǎo)了SENP3持續(xù)的泛素-蛋白酶體途徑降解,使SENP3蛋白量維持在一個很低的基礎(chǔ)水平。
　　

3、 在細胞應(yīng)激狀態(tài)下分子伴侶Hsp90能夠保護很多底物蛋白免于降解[1]。我們通過實驗發(fā)現(xiàn),當(dāng)細胞遭遇輕度的刺激,活性氧升高后,SENP3的243位半胱氨酸(cys)位點受到氧化修飾,作為信號,招募Hsp90分子前來結(jié)合,從而抑制了CHIP作為泛素連接酶對SENP3的泛素化降解作用,使CHIP的功能轉(zhuǎn)變?yōu)榱薍sp90與SENP3相互結(jié)合的支架。
　　 腫瘤里的活性氧水平常常是高于其相應(yīng)的正常組織的。我們通過免疫組化和組織免疫共沉淀