不同產(chǎn)地三葉崖爬藤品質(zhì)評價(jià)及其相關(guān)藥效學(xué)研究.pdf

1、目的:
　　研究不同產(chǎn)地三葉崖爬藤（Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg）的遺傳變異、所含主要的化學(xué)成分的含量、體外抗氧化活性，以及抗炎鎮(zhèn)痛、抗肝損傷作用，優(yōu)選出種質(zhì)優(yōu)良的三葉崖爬藤產(chǎn)地，從而進(jìn)行林下種植，緩解對三葉崖爬藤的需求。
　　方法:
　　1.使用改良的CTAB法進(jìn)行三葉崖爬藤葉中基因組DNA提取，采用ISSR分子標(biāo)記技術(shù)，建立ISSR-PCR反應(yīng)體系，對16個(gè)不同產(chǎn)地三葉

2、崖爬藤進(jìn)行遺傳多樣性分析。2.通過測定三葉崖爬藤新鮮根、莖、葉和干燥后質(zhì)量恒重時(shí)的質(zhì)量，測定失水率;采用紫外分光光度法、高效液相色譜法分別測定三葉崖爬藤中總黃酮、總皂苷、總酚、多糖以及山奈酚、槲皮素、異槲皮苷7個(gè)指標(biāo)行成分的含量。3.采用響應(yīng)曲面分析法對三葉崖爬藤抗氧化提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，在最佳提取工藝條件下進(jìn)行提取，采用ABTS法、DPPH法測定不同產(chǎn)地三葉崖爬藤的抗氧化能力。4.采用二甲苯致小鼠耳腫脹、醋酸扭體和CC14致小鼠肝損傷藥

3、理模型，分別進(jìn)行三葉崖爬藤抗炎、鎮(zhèn)痛和抗肝損傷作用。
　　結(jié)果:
　　1.16個(gè)不同產(chǎn)地三葉崖爬藤具有較大的遺傳差異，可分為A、B、C三類，A類包括S1福建順昌、S2福建邵武、S4福建松溪、S5福建三元、S6福建漳平、S7福建連城、S8福建大田、S12福建沙縣、S14浙江樂清、S15浙江臨安;B類包括S3福建建陽、S9福建永安、S10福建泰寧、S11福建尤溪、S13福建永春;C類包括S16浙江開化。2.失水率方面，S2福建邵

4、武根的失水率最低為62.01％，S8福建大田產(chǎn)三葉崖爬藤莖的失水率最低為66.84％，S7號福建連城葉的失水率最低為80.70％?？傸S酮、總皂苷、總酚、多糖以及山奈酚、槲皮素、異槲皮苷含量方面。分部位考慮，S12福建沙縣產(chǎn)三葉崖爬藤莖中總黃酮、山奈酚含量均最高，分別為113.07 mg·g-1、7830.61μg·g-1; S8福建大田產(chǎn)三葉崖爬藤莖中總皂苷、總酚含量均最高，分別為114.17 mg·g-1、22.36 mg·g-1;S

5、5福建三元產(chǎn)三葉崖爬藤根中多糖含量最高為96.35 mg·g-1;S11福建尤溪產(chǎn)三葉崖爬藤葉中槲皮素、異槲皮苷含量均最高，分別為803.60μg·g-1、9188.72μg·g-1。從全株考慮，S12福建沙縣產(chǎn)三葉崖爬藤中總黃酮、總皂苷、總酚含量均最高，分別為66.97 mg·g-1、49.28mg·g-1、15.16 mg·g-1; S5福建三元產(chǎn)三葉崖爬藤中多糖含量最高為52.48 mg· g-1;S13福建永春產(chǎn)三葉崖爬藤中山奈

6、酚含量最高為5197.23μg·g-1; S11福建尤溪產(chǎn)三葉崖爬藤中槲皮素、異槲皮苷含量均最高，分別為317.52μg·g-1、3105.86μg·g-1。3.響應(yīng)曲面法優(yōu)化得到最佳提取工藝為:提取時(shí)間40 min,液料比26∶1，乙醇濃度50％，提取溫度50℃。在此工藝條件下進(jìn)行16不同產(chǎn)地三葉崖爬藤不同部位提取，發(fā)現(xiàn)S5福建三元、S8福建大田、S9福建永安、S12福建沙縣產(chǎn)三葉崖爬藤清除DPPH和ABTS自由基能力強(qiáng)于12個(gè)產(chǎn)地的