三葉青有效成分測定方法的優(yōu)化及栽培三葉青的品質(zhì)評價.pdf

1、三葉青（Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg）為葡萄科崖爬藤屬植物，近年來我省各地紛紛引種種植三葉青，對三葉青的開發(fā)利用研究正在各地開展，而閩北地區(qū)具有獨(dú)特的自然條件，十分適合三葉青的生長。為了穩(wěn)定和提高三葉青的有效成分含量，指導(dǎo)三葉青的種植，本研究以閩北地區(qū)野生和栽培的三葉青為材料，優(yōu)化了三葉青的總黃酮和多糖的測定方法，并結(jié)合其他成分的測定結(jié)果，對閩北栽培三葉青的品質(zhì)進(jìn)行分析評價，為三葉青產(chǎn)業(yè)的持

2、續(xù)發(fā)展提供理論依據(jù)。
　　從提取條件、顯色條件、空白選擇三個方面對紫外分光光度法測定三葉青中總黃酮的方法進(jìn)行優(yōu)化，獲得的最優(yōu)方法為：取三葉青粉末1.3 g，加40％乙醇50 mL，于90℃水浴回流90 min，放冷，濾過，精密吸取續(xù)濾液1 mL置于25 ml量瓶中，置于40℃水浴中，加5%亞硝酸鈉溶液1 mL，混勻，放置5 min，加5%硝酸鋁溶液1 mL，搖勻，放置15 min，加8%NaOH溶液10 mL，再加40%乙醇至刻度

3、，搖勻，放置10 min。以蘆丁為對照品，以續(xù)濾液為空白，在505 nm波長處測定吸光值。
　　從多糖提取、多糖純化、多糖測定三個方面對紫外分光光度法測定三葉青中多糖的方法進(jìn)行優(yōu)化，獲得的最優(yōu)方法為：取三葉青粉末1.0 g，精密加入0.5 mol·L-1碳酸氫鈉溶液35 mL，置70℃水浴中1.5 h，冷卻，抽濾，收集濾液，再精密加入0.5 mol·L-1碳酸氫鈉溶液35 mL，置70℃水浴中1.5 h，冷卻，抽濾，合并兩次濾液于

4、100 mL量瓶中，加0.5 mol·L-1碳酸氫鈉溶液至刻度，精密吸取8 mL，加入無水乙醇32 mL，搖勻，于4℃靜置5 h，離心（7000 rpm）5分鐘，棄去上清液，再加無水乙醇25 mL，離心5 min，棄去上清液，沉淀低溫干燥，加水溶解并轉(zhuǎn)移至25 mL量瓶中。精密吸取5 mL，加入6 mol·L-1的鹽酸20 mL，回流30 min，冷卻，用6 mol·L-1的NaOH調(diào)pH至中性，轉(zhuǎn)移至100 mL量瓶中，加水至刻度，精

5、密吸取50 mL，減壓濃縮至10 mL，精密吸取3 mL，置25 mL的容量瓶中，加入DNS試液7 mL，于90℃水浴中加熱5 min，迅速冷卻，用水定容至刻度，搖勻，放置20 min，以葡萄糖為對照，在530 nm波長處測定吸光值。
　　以總黃酮、多糖、灰分與酸不溶性灰分、重金屬、總糖、還原糖、低聚糖七個指標(biāo)比較了栽培與野生三葉青的成分及含量差異。栽培三葉青的多糖和低聚糖的含量略高于野生三葉青，總黃酮的含量基本一致，總糖和還原糖

6、的含量略低于野生三葉青，且栽培三葉青和野生三葉青的總黃酮、多糖、總糖、還原糖、低聚糖的含量差距在18.0%的范圍內(nèi)。栽培三葉青的總黃酮和總糖的變異系數(shù)略低于野生三葉青，多糖的變異系數(shù)低于野生三葉青5倍，還原糖和低聚糖的變異系數(shù)略高于野生三葉青。本文所測定的栽培與野生三葉青的各種成分含量差異較小，栽培三葉青的變異系數(shù)總體小于野生三葉青，因此以栽培代替野生作為三葉青的藥用來源是可行的，這不僅有利于保護(hù)野生種質(zhì)資源，使其不被破壞甚至滅絕，而且