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1、顯齒蛇葡萄Ampelopsisgrossedentata(Hand-Mazz)W.T.Wang,系葡萄科蛇葡萄屬的藤本植物,具有清熱解毒、利濕消腫的功效,主治咽喉腫痛、目赤腫痛、黃疸型肝炎等癥。本研究為了更全面地評(píng)價(jià)顯齒蛇葡萄藥材質(zhì)量,篩選優(yōu)良無性系,測(cè)定不同顯齒蛇葡萄無性系及其不同藥用部位中的有效成分的含量,并對(duì)其抗氧化活性及抗炎鎮(zhèn)痛進(jìn)行研究,以了解顯齒蛇葡萄中有效成分含量差別與其相關(guān)藥效間的關(guān)系。本論文主要分為六個(gè)部分,主要內(nèi)容如下
2、:
1.以總黃酮、二氫楊梅素、楊梅苷、楊梅素為指標(biāo),采用星點(diǎn)設(shè)計(jì)-效應(yīng)面法優(yōu)化顯齒蛇葡萄的超聲提取工藝。最終確定了最優(yōu)工藝為30倍量65%乙醇超聲提取30min。
2.通過紫外分光光度法測(cè)定不同無性系及不同季節(jié)顯齒蛇葡萄中總黃酮、總酚、多糖的含量,HPLC法測(cè)定顯齒蛇葡萄中二氫楊梅素、楊梅苷、楊梅素的含量,建立多個(gè)指標(biāo)質(zhì)量分析體系。結(jié)果表明,不同顯齒蛇葡萄無性系間各指標(biāo)的含量存在較大差異,且葉子中各指標(biāo)含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于莖
3、中的含量。結(jié)合主成分聚類分析結(jié)果,將12個(gè)不同顯齒蛇葡萄無性系分為3類。不同季節(jié)各指標(biāo)的含量測(cè)定結(jié)果顯示,顯齒蛇葡萄無性系中各指標(biāo)含量變化趨勢(shì)基本一致,除多糖外各指標(biāo)含量春夏季比秋季要高,采摘顯齒蛇葡萄應(yīng)在4~6月較為合適。
3.建立不同顯齒蛇葡萄無性系HPLC指紋圖譜共有模式,標(biāo)定了13個(gè)共有峰,對(duì)其峰面積進(jìn)行主成分分析,抽取了3個(gè)主成分。根據(jù)三個(gè)主成分的綜合得分聚類分析結(jié)果分成3類,與前面通過6個(gè)指標(biāo)聚類的結(jié)果一致。
4、> 4.采用GC-MS技術(shù)對(duì)顯齒蛇葡萄樣品葉和莖中揮發(fā)油成分進(jìn)行分析。從葉中鑒定出40種化合物,占揮發(fā)油總量的62.64%,從莖中鑒定出26種化合物,占揮發(fā)油總量的50.64%,其中共有成分有11個(gè)。初步確定了葉和莖中的香氣成分,并分析葉和莖中各自的香氣成分差異,為改善顯齒蛇葡萄制品—藤茶的口感提供依據(jù),并且為綜合開發(fā)利用顯齒蛇葡萄資源提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
5.利用DPPH及ABTS兩個(gè)體外抗氧化模型,評(píng)價(jià)不同顯齒蛇葡萄無性系葉和
5、莖的提取液及二氫楊梅素、楊梅苷、楊梅素的體外抗氧化能力。結(jié)果表明,不同顯齒蛇葡萄無性系葉和莖提取液及二氫楊梅素、楊梅苷、楊梅素均存在較強(qiáng)的抗氧化能力,且存在一定差異,葉的抗氧化能力強(qiáng)于莖。由相關(guān)性分析結(jié)果得知,不同顯齒蛇葡萄無性系半數(shù)清除率(IC50)與總黃酮、總酚、二氫楊梅素、楊梅苷、楊梅素的含量均存在極顯著負(fù)相關(guān),以總黃酮的相關(guān)性最高。
6.以二甲苯致小鼠耳腫脹及醋酸致小鼠扭體兩個(gè)模型探討不同等級(jí)顯齒蛇葡萄無性系的抗炎鎮(zhèn)痛
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