山楂黃酮化合物與依折麥布藥動學(xué)相互作用的研究.pdf

1、研究目的：隨著人們生活水平的提高，高血脂及其相關(guān)的心血管疾病已經(jīng)成為我國人群的主要健康問題。由于高血脂發(fā)病機制及其治療的復(fù)雜性，在臨床上，使用一種藥物很難達到滿意的治療效果，有時需兩種或兩種以上的藥物聯(lián)合治療。依折麥布是一種新型調(diào)脂藥物，能強效抑制小腸膽固醇和植物甾醇的吸收，且毒性小，是治療高脂血癥的重要藥物；但是，由于該藥物溶解度較低，生物利用度不高，影響了其藥效的發(fā)揮。山楂是一種藥食同源性的植物果實，能顯著降低血清膽固醇及甘油三酯水

2、平，有效防治動脈粥樣硬化的進程，因而受到越來越多患者的青睞，這也提高了其與臨床降脂藥物聯(lián)合用藥的幾率,增加了發(fā)生相互作用的風險。很多研究證明了山楂中發(fā)揮降血脂作用的主要成分是黃酮類化合物。因此，本課題旨在從體內(nèi)外兩方面研究山楂中黃酮化合物（木犀草素，槲皮素,兒茶素及其混合物）與臨床降脂藥物依折麥布的藥動學(xué)相互作用及可能的作用機理，從而為其臨床的合理使用提供參考。
　　實驗內(nèi)容包括以下三部分：
　?。?）山楂黃酮化合物對依折麥

3、布藥物代動力學(xué)影響的研究建立測定大鼠血漿中依折麥布含量的UPLC-MS/MS法；采用整體的大鼠體內(nèi)藥代動力學(xué)實驗，研究山楂黃酮化合物同時給藥和長期給藥（15天）對依折麥布藥代動力學(xué)的影響；
　?。?）山楂黃酮化合物對依折麥布在體腸吸收影響的研究建立測定大鼠腸灌流液中依折麥布含量的 HPLC法；采用大鼠在體腸循環(huán)灌流法研究山楂黃酮化合物對依折麥布腸吸收動力學(xué)的影響；
　?。?）山楂黃酮化合物對依折麥布體外代謝影響的研究建立大鼠

4、肝微粒體中依折麥布含量測定的 HPLC法；采用肝微粒體體外溫孵法研究山楂黃酮化合物對依折麥布體外代謝的影響。
　　實驗結(jié)果:
　?。?）藥動學(xué)結(jié)果顯示，①依折麥布在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)參數(shù)如下：t1/2和Tmax分別為8.39?1.25 h和2.67?1.25 h，而AUC0-36h和Cmax分別為23.22?1.03 ng/mL*h和2.00?0.96 ng/mL。同時服用黃酮混合物后，依折麥布的 t1/2和 Tmax為9

5、.64?2.59 h和2.67?1.15 h，分別延長了14.9％（P＞0.05），0%（P＞0.05）。AUC0-36h和Cmax分別為28.65?0.72 ng/mL*h和3.23?1.48 ng/mL，分別升高23.5%（P＞0.05）和61.5%（P＞0.05）；②同時服用木犀草素后，依折麥布的 t1/2和 Tmax分別為11.03?1.58和4.00?0.10 h，分別延長了31.5%（P＞0.05），49.8%（P＞0.05

6、）。AUC0-36h和Cmax分別為24.45?6.67 ng/mL*h和3.18?1.17 ng/mL，分別升高5.3%（P＞0.05）和59.0%（P＞0.05）；③同時服用槲皮素及兒茶素后，依折麥布的t1/2和Tmax有一定的延長（P＞0.05），Cmax和AUC0-36h未發(fā)生明顯變化(P＞0.05)；
　　（2）藥動學(xué)結(jié)果顯示，①與黃酮混合物長期服用后，依折麥布的t1/2和Tmax分別為9.24?2.15和4.67?1.

7、15 h，分別延長了10.1%（P＞0.05），74.9%（P<0.05）。AUC0-36h和Cmax分別為38.99?8.48 ng/mL*h和5.48?1.87 ng/mL，分別升高67.9%（P<0.05）和174%（P<0.05）；②長期服用木犀草素后，依折麥布的t1/2和Tmax分別為8.48?0.71和4.00?0.95 h，分別延長了1.07%（P＞0.05），49.8%（P＞0.05）。AUC0-36h和Cmax分別為3

8、0.79?4.0 ng/mL*h和3.33?0.95 ng/mL，分別升高32.6%（P＞0.05）和66.5%（P＞0.05）；③長期服用槲皮素及兒茶素后，依折麥布t1/2和Tmax均有所延長(P＞0.05)，Cmax和AUC0-36h未發(fā)生明顯變化(P＞0.05)；
　?。?）大鼠在體腸循環(huán)灌流實驗結(jié)果顯示：依折麥布在小腸中的表觀吸收速率常數(shù)和單位時間百分吸收轉(zhuǎn)化率分別為0.698?0.12 h-1和0.278?0.07 h-

9、1，與木犀草素，槲皮素，兒茶素及黃酮混合物合用后，表觀速率常數(shù)分別為0.711?0.21,0.715?0.18，0.708?0.20，0.701?0.17 h-1（P＞0.05）；而單位時間百分吸收轉(zhuǎn)化率分別為0.279?0.076，0.307?0.085，0.282?0.075，0.299?0.071 h-1（P＞0.05）。
　?。?）依折麥布在大鼠肝微粒體孵育體系中的Ⅰ相酶促動力學(xué)實驗結(jié)果表明其最佳孵育時間，蛋白濃度和底物濃

10、度分別為40 min，1.0 mg/mL，30μmol/L。根據(jù)米氏方程計算，依折麥布的Ⅰ相酶動力學(xué)參數(shù) Km，Vmax和 Clint分別是46.93μmol/L，2.579μmol/min/mg protein，0.093 L/min/mg protein。依折麥布的Ⅱ相酶促動力學(xué)實驗結(jié)果表明其最佳孵育條件分別為20 min，0.4 mg/mL，40μmol/L。其Ⅱ相酶動力學(xué)參數(shù) Km，Vmax和 Clint分別是26.07μmol

11、/L，2.762μmol/min/mg protein，0.095 L/min/mg protein。
　?。?）木犀草素，槲皮素，兒茶素及黃酮混合物對參與依折麥布生物轉(zhuǎn)化的Ⅰ相代謝酶的IC50值分別為6.76μmol/L，5.35μmol/L，12.82μmol/L，2.06μg/mL，木犀草素，槲皮素及黃酮混合物對參與依折麥布生物轉(zhuǎn)化的Ⅰ相代謝酶的Ki值分別為11.16μmol/L，21.72μmol/L，3.40μg/mL；

12、而對參與依折麥布生物轉(zhuǎn)化的Ⅱ相代謝酶的IC50值分別為21.07μmol/L，47.49μmol/L，52.70μmol/L，50.96μg/mL，Ki值分別為53.00μmol/L，54.50μmol/L，55.19μmol/L，57.34μg/mL。
　　結(jié)論：
　?。?）黃酮化合物木犀草素，槲皮素，兒茶素及黃酮混合物對依折麥布在體小腸吸收具有一定的促進作用，但不具有顯著性差異。
　?。?）山楂中的木犀草素和槲皮素