GBP5、KLF2基因在潛伏結(jié)核感染人群中表達(dá)研究.pdf

1、目的：探討 GBP5和 KLF2這兩個(gè)目的基因在潛伏結(jié)核感染人群中的表達(dá)情況，并同時(shí)與它們?cè)谕筷?yáng)結(jié)核病患者及健康人群中表達(dá)情況進(jìn)行比較。分析兩種目的基因在三組人群中相對(duì)表達(dá)量的差異，確定潛伏結(jié)核感染(LTBI)人群中將來(lái)有可能發(fā)展成為結(jié)核病患者的表達(dá)閾值。為 LTBI高危人群的篩選找到合適的標(biāo)志物，以便對(duì)這組人群進(jìn)行精準(zhǔn)的化學(xué)預(yù)防，控制結(jié)核病的發(fā)生。
　　方法：在一家綜合醫(yī)院呼吸科和一家結(jié)核病專(zhuān)科醫(yī)院兩家單位，共收集180例受試者

2、，分為三組，以痰涂片是否找到結(jié)核分枝桿菌（MTB））和γ-干擾素釋放試驗(yàn)QFT結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，分別為涂陽(yáng)結(jié)核病患者組60例，潛伏結(jié)核感染者組（QFT陽(yáng)性）60例，健康人群組（QFT陰性）60例，對(duì)符合條件的受試者，每人抽取外周全血4ml，并給予肝素鋰抗凝處理。然后在兩小時(shí)內(nèi)，置于離心機(jī)內(nèi)，分離T淋巴細(xì)胞，提取 RNA。然后通過(guò)反轉(zhuǎn)錄酶作用，合成 cDNA。再以 cDNA為模板，通過(guò)前期合成的引物引導(dǎo)，合成目的基因片段。對(duì)合成的目的基因片段采

3、用 RT-PCR技術(shù)，進(jìn)行基因擴(kuò)增，通過(guò)定時(shí)定量?jī)x器，測(cè)得兩種目的基因的 CT值。用2-△△CT法，對(duì)目的基因進(jìn)行差值校正，求得兩種目的基因 GBP5、KLF2在三組受試者中的相對(duì)表達(dá)量。通過(guò) SPSS18.0統(tǒng)計(jì)分析軟件對(duì) GBP5、KLF2在三組人群的相對(duì)表達(dá)量數(shù)值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，觀(guān)察差異是否有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。如果統(tǒng)計(jì)分析有效，則進(jìn)一步進(jìn)行均值的比較，并分別確定兩種目的基因的表達(dá)閾值。同時(shí)對(duì)可能存在的其他情況進(jìn)行分析比較。
　　結(jié)

4、果：1、三組受試者中，GBP5相對(duì)表達(dá)量差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），GBP5相對(duì)表達(dá)量，在涂陽(yáng)結(jié)核病患者組中表達(dá)最高，在潛伏結(jié)核感染人群組中次之，在健康人群組中表達(dá)最低。2、三組受試者中，KLF2相對(duì)表達(dá)量差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），KLF2相對(duì)表達(dá)量，在涂陽(yáng)結(jié)核病患者組中表達(dá)最高，在潛伏結(jié)核感染者中次之，在健康人群組組中表達(dá)最低。3、對(duì)于潛伏結(jié)核感染人群中遠(yuǎn)期進(jìn)展為結(jié)核病可能性高的群體，上述兩個(gè)目的基因表達(dá)閾值的界定：GB

5、P5相對(duì)表達(dá)量在1.17~1.25范圍內(nèi)，未來(lái)發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)高，是精準(zhǔn)預(yù)防的對(duì)象。KLF2相對(duì)表達(dá)量在1.11~1.21范圍內(nèi)，未來(lái)發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)高，是精準(zhǔn)預(yù)防的對(duì)象。4、GBP5、KLF2可以區(qū)別潛伏結(jié)核感染與活動(dòng)性結(jié)核病。
　　結(jié)論：1、GBP5在三組受試者中相對(duì)表達(dá)量不同，GBP5可以用來(lái)篩選潛伏結(jié)核感染人群中遠(yuǎn)期進(jìn)展為結(jié)核病可能性高的群體。2、KLF2在三組受試者中相對(duì)表達(dá)量不同，KLF2可以用來(lái)篩選潛伏結(jié)核感染人群遠(yuǎn)期進(jìn)展為結(jié)核病可