黃波羅組織培養(yǎng)及愈傷組織中小檗堿代謝調(diào)控的研究.pdf

1、本試驗在黃波羅種源調(diào)查的基礎(chǔ)上，以帶嶺種源小檗堿含量最高的單株種子做為初始材料進行黃波羅的快繁和愈傷組織培養(yǎng)的研究，并對不同培養(yǎng)條件下愈傷組織中小檗堿的含量進行了測定。得出結(jié)果如下： 1．愈傷組織的誘導(dǎo)培養(yǎng)：比較了MS、WPM、NT、IS、B5五種基本培養(yǎng)基，發(fā)現(xiàn)高鹽MS培養(yǎng)基適合于黃波羅愈傷組織的誘導(dǎo)；生長素2,4-D、NAA均對黃波羅愈傷組織誘導(dǎo)有較大的促進作用；配合使用適量的細胞分裂素6-BA時效果更好，高濃度生長素則對誘

2、導(dǎo)有抑制作用。外植體在MS基本培養(yǎng)基+0.3 mg·L-16-BA+2.0 mg/LNAA培養(yǎng)基中誘導(dǎo)效果最好，愈傷組織誘導(dǎo)率在90％以上，且此條件下誘導(dǎo)出得愈傷組織質(zhì)地緊密，表面具有光澤，生長旺盛，適合于繼代培養(yǎng)。愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)最適pH值為6.3；最適蔗糖濃度為20 g·L<'-1>；接種方式以0.7 cm長度橫放在培養(yǎng)基表面效果最好。 2．愈傷組織的繼代培養(yǎng)：繼代培養(yǎng)以MS為基本培養(yǎng)基時，愈傷組織褐化嚴重，最適基本培養(yǎng)基為

3、NT培養(yǎng)基。單獨使用NAA時，以1.0 mg/L效果最好；配合使用6．BA時，以0.3 mg/L6-BA+1.0 mg/LNAA誘導(dǎo)效果最好。此條件下，愈傷組織生長率達392％，且愈傷組織生長量明顯大于前者。 3．小檗堿愈傷組織代謝培養(yǎng)體系的建立：NT培養(yǎng)基添加0.3mg/L 6-BA+1.0mg/LNAA，pH值6.3左右，蔗糖濃度20g·L<'-1>，培養(yǎng)3周其含量達到最大，繼代培養(yǎng)4代后小檗堿含量最高，達干重的2.14％。