誘導(dǎo)培養(yǎng)條件對甘草愈傷組織次生代謝產(chǎn)物多樣性的影響.pdf

1、甘草資源的大量使用和長期過度開發(fā)使得世界上的野生甘草資源面臨枯竭的危機,甘草植物細(xì)胞和組織培養(yǎng)作為一個培養(yǎng)生產(chǎn)中藥植物藥用成分或組分的技術(shù),對大規(guī)模生產(chǎn)藥用甘草次生代謝產(chǎn)物及其活性組分具有重要的意義。
　　本文的主要研究目的是采用化學(xué)分析和高效液相色譜(HPLC)相結(jié)合的方法評價典型愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)條件對甘草愈傷組織次生代謝產(chǎn)物多樣性的影響,這些誘導(dǎo)培養(yǎng)條件包括甘草種屬、外植體、光照條件、激素組成、激素濃度水平和基礎(chǔ)培養(yǎng)基。首先采

2、用不同誘導(dǎo)條件獲得甘草愈傷組織,接著觀察甘草愈傷組織的長勢狀況,發(fā)現(xiàn)外植體對甘草愈傷組織誘導(dǎo)率影響最大,采用胚軸和胚根為外植體誘導(dǎo)的甘草愈傷組織誘導(dǎo)率均為100％,采用子葉為外植體進行誘導(dǎo)的愈傷組織誘導(dǎo)率卻只有30%~70%,其他的誘導(dǎo)條件對甘草愈傷組織的誘導(dǎo)率影響不明顯;不同誘導(dǎo)條件除光照條件外對甘草愈傷組織生長狀態(tài)影響相似,表現(xiàn)為黑暗條件下誘導(dǎo)的甘草愈傷組織顏色為黃色或淡黃色,光照條件下誘導(dǎo)的甘草愈傷組織大部分為綠色,愈傷組織生長狀

3、態(tài)良好。
　　愈傷組織生長穩(wěn)定后,采用化學(xué)分析和HPLC相結(jié)合的方法評價不同誘導(dǎo)條件下獲得的甘草愈傷組織次生代謝產(chǎn)物多樣性的影響。采用單因素方差分析法評價不同誘導(dǎo)條件對甘草愈傷組織總酚及總黃酮含量的影響,結(jié)果顯示甘草種屬、外植體、光照條件、激素濃度水平和基礎(chǔ)培養(yǎng)基對甘草愈傷組織中總黃酮的含量影響極其顯著(P<0.01),激素組成只對甘草愈傷組織中總酚的含量具有極其顯著的影響,對愈傷組織中總黃酮的含量卻不具有顯著的影響(P≥0.05