?。~歲）同工酶和RAPD標(biāo)記的研究.pdf

1、遺傳標(biāo)記是進(jìn)行分類、種質(zhì)鑒定、遺傳育種及進(jìn)化等研究的主要技術(shù)指標(biāo)之一，主要分為形態(tài)學(xué)標(biāo)記、細(xì)胞學(xué)標(biāo)記、生化遺傳標(biāo)記和分子標(biāo)記等四種類型。目前已被廣泛地應(yīng)用到水產(chǎn)學(xué)領(lǐng)域。本文對丁(魚歲)的同工酶和RAPD進(jìn)行研究分析，旨為其種質(zhì)資源鑒定和評價以及選育種提供理論依據(jù)。 同工酶研究采用不連續(xù)垂直平板聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)法，對丁(魚歲)的晶狀體、心臟、腦、腎臟、肝臟和肌肉等六種組織的八種酶(LDH、MDH、α-AMY、G6PD

2、H、ADH、AKP、EST、POD)的同工酶的酶譜特征及其基因位點(diǎn)進(jìn)行了檢測。結(jié)果表明，(1)丁(魚歲)的各種同工酶的編碼基因和亞基組成為：LDH同工酶是四聚體酶，由三個基因位點(diǎn)編碼；MDH同工酶有上清液型(s-MDH)和線粒體型(m-MDH)兩種類型，分別由兩個基因位點(diǎn)(Mdh-A、Mdh-B和Mdh-C、Mdh-D)編碼，各形成三種二聚體；α-AMY同工酶是由一位點(diǎn)兩個等顯性等位基因編碼的單體酶，等位基因有純合和雜合現(xiàn)象；G6PDH

3、同工酶是由兩個等顯性等位基因編碼的兩個不同亞基所構(gòu)成；ADH同工酶由一個基因座位編碼的同二聚體；AKP同工酶是由同一基因編碼單體酶；EST同工酶是單體酶，由四個基因位點(diǎn)編碼；魚類POD亞基組成還不清楚，根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果，推測丁(魚歲)的POD同工酶是由二個基因位點(diǎn)編碼的二聚體。(2)同工酶的基因表達(dá)和酶活性都存在不同程度的組織特異性，這是基因在不同組織中的表達(dá)與各組織的代謝功能密切相關(guān)的結(jié)果。(3)丁(魚歲)的同工酶的基因表達(dá)和酶活性個體差

4、異不明顯，具有種屬特異性，可以作為丁(魚歲)的生化遺傳標(biāo)記。 用20個引物對36尾丁(魚歲)進(jìn)行了RAPD分析。在18個可供分析的引物共擴(kuò)增出114條帶，每個引物產(chǎn)生的條帶數(shù)在3～9之間，擴(kuò)增的片段大小在0.3～3Kb之間。其中4個引物擴(kuò)增出多態(tài)性片段，占引物總數(shù)的22.22％，多態(tài)座位比例為10.5％。根據(jù)RAPD擴(kuò)增產(chǎn)物對丁(魚歲)遺傳結(jié)構(gòu)的分析表明：(1)個體間遺傳相似性系數(shù)F在0.8842～0.9684之間，平均值為0.