鉛的心血管毒性及其機制研究.pdf

1、目的：探討乙酸鉛的心血管毒性作用及其可能的毒性作用機制;為鉛暴露致心血管系統(tǒng)毒性的風險評估提供依據。
　　方法：選用SPF級健康雄性大鼠(170-180g)40只，適應環(huán)境1周后，大鼠被隨機化分為對照組(0mg/kg)、低濃度組(90mg/kg)、中濃度組(180mg/kg)和高濃度組（360mg/kg），每組10只。染毒組應用經口的灌胃的形式進行乙酸鉛溶液的染毒，灌胃的容量為10mL/kg，每天灌胃染毒均1次，每周持續(xù)染毒5d，

2、共需染毒8周，對照組灌胃相同容積的蒸餾水。每天對大鼠的攝食、飲水、行為相關活動、尿液、糞便等是否出現異常進行觀察。在最后一次染毒的12h后應用應用尾袖法測量大鼠的血壓和心率水平，在最后一次染毒的12h后處死大鼠，石墨爐原子吸收光譜法測定全血血鉛，全自動生化分析儀測定外周血血清高敏C反應蛋白和心肌酶譜（肌酸激酶的同工酶、、谷草轉氨酶、羥丁酸脫氫酶、乳酸脫氫酶）;酶聯免疫吸附法檢測大鼠血漿內皮素-1、血清細胞間粘附分子-1水平，取部分心臟和

3、胸主動脈組織，HE染色觀察組織病理學改變。取血清和心臟組織勻漿測定白介素-6、丙二醛、超氧化物歧化酶活性、白介素-1β、谷胱甘肽、活性氧、白介素-8、腫瘤壞死因子-α含量。免疫組織化學技術法測定大鼠心臟和胸主動脈組織B細胞淋巴瘤相關X蛋白、B細胞淋巴瘤、核轉錄因子蛋白表達。
　　結果：⑴實驗期間觀察發(fā)現，對照組和低劑量乙酸鉛染毒組大鼠活動及攝食飲水均正常，被毛光滑整潔，未觀察到明顯的中毒癥狀。但是當同對照組進行比較的時候，中濃度、

4、高濃度的染毒組大鼠出現進食量降低、腹瀉、被毛蓬松等一般中毒癥狀。大鼠血壓心率指標變化結果:與對照組比較，染毒結束后各劑量染毒組大鼠收縮壓水平顯著升高(P＜0.05)。乙酸鉛對大鼠心臟的功能和血管損傷指標的影響為:同對照組相對比，低濃度、中濃度、高濃度染毒組大鼠血清乳酸脫氫酶和羥丁酸脫氫酶水平均顯著升高（P＜0.05），中、高劑量染毒組大鼠血清中肌酸激酶同工酶和高敏C反應蛋白含量均顯著升高(P＜0.05);高劑量染毒組大鼠血漿內皮素-1和

5、血清血清細胞間粘附分子-1水平都增加(P＜0.05)，而且隨著醋酸鉛染毒濃度的增加，大鼠血漿內皮素-1和血清細胞間粘附分子-1水平均呈上升趨勢。大鼠心血管組織病理變化結果:對照組和低劑量染毒組大鼠的心肌組織結構正常，心肌細胞排列整齊緊密，組織無明顯炎癥反應;中劑量染毒組大鼠心肌組織結構基本正常，心肌細胞排列整齊，部分心肌細胞內可見胞漿凝聚的深染斑塊，有炎癥細胞的浸潤;高劑量染毒組大鼠的心肌纖維排列紊亂、疏松，部分心肌纖維斷裂，萎縮變細，

6、心肌間隙可見炎性細胞浸潤，炎癥細胞主要表現為漿細胞。對照組和低、中劑量染毒組大鼠的血管組織整體結構正常，各層膜的整體結構清楚可見，無明顯病變;高劑量染毒組大鼠的血管中、內層膜結構清晰，無明顯增生，細胞的排列形式規(guī)整而密集，外膜可見大量炎癥細胞浸潤。⑵大鼠血清和心臟組織勻漿氧化應激指標結果:同對照組相對比，低濃度、中濃度、高濃度組大鼠血清谷胱甘肽水平均明顯降低（P＜0.05），中、高劑量染毒組大鼠血清活性氧和丙二醛含量均顯著升高（P＜0.

7、05）。中、高劑量染毒組大鼠心臟組織勻漿活性氧水平較對照組均顯著升高（P＜0.05），高劑量染毒組大鼠心臟組織勻漿丙二醛水平較對照組顯著升高（P=0.005）。大鼠血清和心臟組織勻漿炎性細胞因子指標結果:與對照組比較，中、高劑量染毒組大鼠血清白介素-8和腫瘤壞死因子含量顯著升高（F=7.607，P=0.001;Welch=3.911，P=0.027）;高劑量染毒組大鼠血清白介素-1β含量較對照組顯著升高（F=3.159，P=0.038）

8、，且隨著乙酸鉛染毒劑量的升高，大鼠血清白介素-1β、白介素-6、白介素-8和腫瘤壞死因子-α的水平均呈上升趨勢。高劑量染毒組大鼠心臟組織勻漿白介素-8含量顯著高于對照組（Welch=4.228,P=0.025）。大鼠心臟和胸主動脈組織Bax/Bcl-2蛋白表達結果:與對照組比較，低、中、高劑量染毒組大鼠心臟組織中Bax蛋白平均光密度值高于對照組（P＜0.05）;中、高劑量染毒組大鼠胸主動脈組織中Bax蛋白平均光密度值高于對照組（P＜0.

9、05）。低、中、高劑量染毒組大鼠胸主動脈組織中Bcl-2蛋白平均光密度值較對照組顯著降低（P＜0.05）。大鼠心臟和胸主動脈組織Nrf2蛋白表達結果:中、高劑量染毒組大鼠心臟和胸主動脈組織中Nrf2蛋白的平均光密度數據都較對照組增加（P＜0.05）。大鼠心臟組織勻漿活性氧含量與血清肌酸激酶同工酶、乳酸脫氫酶含量相關性分析結果:大鼠心臟組織勻漿活性氧與血清肌酸激酶同工酶、乳酸脫氫酶含量均呈正相關關系，相關系數r分別為0.661、0.599

10、，差異具有統(tǒng)計學水平上的意義（P＜0.05）。
　　結論：①在本次乙酸鉛染毒實驗條件下，大鼠心血管組織出現病理性損傷，表現為炎性損傷和細胞凋亡，心功能指標和內皮損傷指標發(fā)生改變，提示乙酸鉛可導致大鼠心血管系統(tǒng)損傷。②大鼠心臟組織勻漿活性氧含量與心功能指標相關性分析結果提示，乙酸鉛的心血管毒性可能與其引起的大鼠氧化應激損傷有關。而且核轉錄因子Nrf2蛋白表達的變化提示，乙酸鉛可激活Nrf2/ARE信號通路的抗氧化能力，而當活性氧升高