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文檔簡介
1、背景:
磨損顆粒誘導(dǎo)的骨溶解是關(guān)節(jié)假體無菌性松動(dòng)的主要原因。參與這一復(fù)雜生物學(xué)效應(yīng)的細(xì)胞包括巨噬細(xì)胞、破骨細(xì)胞、骨(成骨)細(xì)胞、滑膜成纖維樣細(xì)胞(fibro-like synoviocytes FLSs)、淋巴細(xì)胞等。顆粒引起的慢性炎癥反應(yīng),導(dǎo)致假體周圍組織內(nèi)巨噬細(xì)胞聚集,趨化因子,細(xì)胞因子等釋放最終激活RANKL-OPG信號(hào)通路并誘導(dǎo)破骨細(xì)胞分化成熟造成骨的吸收是假體松動(dòng)的發(fā)生的研究共識(shí)。假體周圍組織長期處于相對(duì)缺氧狀態(tài),H
2、IF-1α的表達(dá)對(duì)細(xì)胞缺氧耐受的建立至關(guān)重要。有研究表明HIF-1α的表達(dá)骨發(fā)育及骨折愈合中血管長入也起著重要的促進(jìn)作用。前期通過免疫組織化學(xué)染色發(fā)現(xiàn)界膜中大量的RANKL、OPG以及HIF-1α的表達(dá),推測界膜中HIF-1α與RANKL-OPG信號(hào)通路存在相互作用,并與假體無菌性松動(dòng)密切相關(guān)。
目的:
建立體外關(guān)節(jié)假體無菌性松動(dòng)界膜的滑膜成纖維樣細(xì)胞模型。研究鈦金屬顆粒誘導(dǎo)松動(dòng)界膜中滑膜成纖維樣細(xì)胞HIF-1α表達(dá)
3、和RANKL/OPG信號(hào)通路活化情況及兩者的相關(guān)性,探究HIF-1α與RANKL-OPG信號(hào)通路在假體無菌性松動(dòng)中的作用。
方法:
收集健康成人的滑膜組織,分離提取人滑膜成纖維樣細(xì)胞,流式細(xì)胞技術(shù)檢測滑膜成纖維樣細(xì)胞純度,并與鈦金屬顆粒共培養(yǎng)模擬體內(nèi)松動(dòng)界膜中細(xì)胞的生存環(huán)境,建立體外細(xì)胞模型,MTT法檢測細(xì)胞活性和增殖情況,驗(yàn)證模型可行性。QRT-PCR、Western blotting檢測不同濃度梯度和刺激時(shí)間的鈦
4、金屬顆粒刺激下,F(xiàn)LSs細(xì)胞RANKL、OPG、HIF-1α的mRNA和蛋白表達(dá)情況。
結(jié)果:
鈦顆??梢源龠M(jìn)滑膜成纖維樣細(xì)胞增殖。隨鈦顆粒濃度增加,RANKL/OPG和HIF-1α的蛋白和mRNA水平均呈遞增趨勢;隨鈦顆粒刺激時(shí)間增加,RANKL/OPG的蛋白和mRNA水平先增高后降低,HIF-1α則呈遞增趨勢。
結(jié)論:
鈦金屬顆粒刺激可以誘導(dǎo)滑膜成纖維樣細(xì)胞增殖;鈦金屬顆??梢哉T導(dǎo)滑膜成纖維細(xì)
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