鎘致HEK293細胞離體線粒體損傷的研究.pdf

1、鎘可以誘導HEK 293細胞發(fā)生凋亡并且其凋亡依賴于線粒體途徑。研究鎘誘導的線粒體損傷對于鎘的分子毒理學機制的闡明和鎘所致的損傷與致癌機理的研究具有重要意義。本文對鎘誘導的HEK 293細胞離體線粒體損傷做了如下研究工作： 1、鎘對HEK 293細胞離體線粒體膜的損傷 建立鎘致HEK 293細胞離體線粒體膜損傷模型，采用分光光度法檢測CdCl2誘導的線粒體滲透性轉變孔的開放情況；通過透射電鏡鑒定CdCl2誘導的線粒體形態(tài)

2、的改變；采用熒光分光光度計檢測線粒體膜電位的變化。結果顯示：CdCl2能夠誘導HEK293細胞離體線粒體的功能損傷，鎘嚴重損傷了線粒體的膜系統(tǒng)，導致線粒體膜電位的急劇下降，CdCl2能誘導線粒體滲透性轉變孔的開放，并且這種開放能夠被環(huán)胞素(CsA)所抑制；電鏡結果顯示CdCl2誘導下線粒體腫脹變形。 2、鎘致HEK 293細胞離體線粒體活性氧及抗氧化系統(tǒng)的變化 本實驗利用熒光探針DCFH-DA檢測了線粒體內ROS含量的變

3、化；測定了線粒體內兩種主要的抗氧化酶SOD和GSH-Px的活力；同時測定了線粒體內MDA的含量變化。結果表明：鎘能夠引起ROS含量的顯著增加: SOD和GSH-Px酶活力在鎘的作用下降低明顯。說明CdCl2誘導的離體線粒體氧化損傷，氧化應激可能在鎘引發(fā)的細胞凋亡過程中起重要作用。 3、鎘對IIEK 293細胞離體線粒體酶活力的影響 檢測CdCl2對HEK 293細胞離體線粒體酶活力的影響，主要對與細胞呼吸相關的ATPas