養(yǎng)殖大菱鲆常用餌料攜帶的細(xì)菌與其疾病發(fā)生的相關(guān)性分析.pdf

1、大菱鲆自1992年引入我國以來，以其獨(dú)特的生物學(xué)特性，迅速發(fā)展成為我國海水養(yǎng)殖的一個支柱產(chǎn)業(yè)，由此引發(fā)了我國海水養(yǎng)殖的第四次浪潮。截止2005年，養(yǎng)殖面積已超過500多萬平方米，養(yǎng)殖企業(yè)數(shù)量達(dá)700多家，產(chǎn)量近5萬噸左右，總產(chǎn)值超過70億元人民幣，已取得了良好的經(jīng)濟(jì)和社會效益。然而，在大菱鲆集約化養(yǎng)殖深入發(fā)展的同時，由于養(yǎng)殖密度過高、殘餌、糞便等的積累，致使病原微生物大量繁殖，造成魚體發(fā)病，疾病問題越來越成為制約大菱鮃養(yǎng)殖業(yè)健康、穩(wěn)定和

2、快速發(fā)展的瓶頸。 為了查明病因，找出病原細(xì)菌的真正來源，我們課題組于2005～2007年間，對山東省的大多數(shù)大菱鲆養(yǎng)殖場展開餌料細(xì)菌調(diào)查，在調(diào)查的上百家大菱鲆養(yǎng)殖廠使用的飼料中，有90％以上的廠家使用的餌料都攜帶有不同數(shù)量的細(xì)菌，尤其是使用小雜魚的養(yǎng)殖廠，細(xì)菌含量多在10<'8>CFU/g左右。為了查明餌料攜帶細(xì)菌與養(yǎng)殖大菱鲆疾病發(fā)生的關(guān)系，在調(diào)查的過程中，我們有幸獲得了煙臺一家大菱鲆養(yǎng)殖場的患有腹水病的大菱鲆和餌料小雜魚，通過

3、對這個養(yǎng)殖系統(tǒng)的井水、養(yǎng)殖池水和小雜魚的細(xì)菌檢測，發(fā)現(xiàn)小雜魚攜帶細(xì)菌與從病魚體內(nèi)獲得的細(xì)菌具有形態(tài)上的一致性，通過人工感染試驗，發(fā)現(xiàn)這兩株細(xì)菌(FS-1和RF-1)都是致病菌，都能使健康的大菱鲆患上腹水病，其發(fā)病特征基本一致。經(jīng)過API-ID32E鑒定結(jié)合傳統(tǒng)的生理生化鑒定，并進(jìn)行16SrRNA基因序列分析，細(xì)菌FS-1和RF-1為同一種細(xì)菌溶藻弧菌(V.alginolyticus)。 用同樣的方法，發(fā)現(xiàn)萊州、蓬萊和威海三家大菱

4、鲆養(yǎng)殖廠的大菱鲆均不同程度的患上了白便癥，而且這三家養(yǎng)殖廠使用的顆粒飼料所攜帶的細(xì)菌與病原菌具有一致性，經(jīng)上述方法進(jìn)行嚴(yán)格的細(xì)菌學(xué)鑒定，這兩株細(xì)菌(BB-1和KL-1)為假交替單胞菌屬(Pseudoalteromonas sp)中的某一種細(xì)菌。 在此研究的基礎(chǔ)上，對這四株株細(xì)菌進(jìn)行了藥物敏感性試驗，試驗結(jié)果表明細(xì)菌FS-1和RF-1的藥敏譜基本一致，細(xì)菌BB-1和KL-1的藥敏譜也一致。再次表明小雜魚和顆粒飼料攜帶細(xì)菌也能導(dǎo)致大

5、菱鲆發(fā)病，它們是大菱鲆疾病發(fā)生的直接傳染源。但是，從衛(wèi)生的角度分析，顆粒飼料攜帶細(xì)菌的量明顯低于小雜魚細(xì)菌的攜帶量。同時，對動物性餌料也進(jìn)行了細(xì)菌檢測，雖然沒有直接證實苗期大菱鲆疾病的發(fā)生與動物性餌料攜帶細(xì)菌之間的關(guān)系，但是它們攜帶的細(xì)菌量巨大，尤其是輪蟲，細(xì)菌數(shù)量可達(dá)到10<'8>CFU/g左右。在對威海一家大菱鲆育苗場的疾病調(diào)查過程中，發(fā)現(xiàn)冰凍鹵蟲攜帶的細(xì)菌有90％以上都是弧菌屬細(xì)菌，而且優(yōu)勢度極高。對于這些攜帶細(xì)菌和弧菌的致病性沒

6、有深入研究，然而可以預(yù)言這些攜帶有某種優(yōu)勢度極高的細(xì)菌的生物餌料必然會導(dǎo)致苗期的大菱鲆發(fā)病。另外，萊州一家條斑星鰈育苗場10余天的幼苗發(fā)生可疑的腹水病，通過對整個育苗系統(tǒng)的細(xì)菌調(diào)查發(fā)現(xiàn)，從患病魚體分離到A、B和C三株細(xì)菌與從輪蟲獲得的三株細(xì)菌LH-1、LH-2和LH-3菌落形態(tài)一致，而其他樣品不含有這三株菌，因此，可以初步確定病原菌來自輪蟲，所以，加強(qiáng)動物性餌料的健康衛(wèi)生培養(yǎng)，優(yōu)化培養(yǎng)方法，是防止苗期大菱鲆疾病發(fā)生的關(guān)鍵性所在。

7、 2006年5月，萊州一家塞內(nèi)加爾鰨(Solea senegalensis)育苗場發(fā)生較為嚴(yán)重的怪病，當(dāng)幼苗生長到10幾天時全身變黑，很快死亡，死亡率接近100％。就這一現(xiàn)象，我們對整個育苗系統(tǒng)進(jìn)行細(xì)菌調(diào)查，調(diào)查結(jié)果發(fā)現(xiàn)，病魚所攜帶的細(xì)菌，標(biāo)號為SN-1與從該育苗系統(tǒng)所使用的有益菌MIC中分離到的一株菌，標(biāo)號為M-1，形態(tài)極為相似，經(jīng)過細(xì)菌的培養(yǎng)得知這兩株細(xì)菌都為弧菌，就對其中一株M-1進(jìn)行藥敏試驗，結(jié)果發(fā)現(xiàn)這不是普通的弧菌，對多數(shù)抗生