aFGF對高血糖小鼠潰瘍療效及機制的研究與臨床糖尿病患者潰瘍超微結構的觀察.pdf

1、目的：探討酸性成纖維細胞生長因子（aFGF）對高脂高糖、鏈脲佐菌素（STZ）誘導的高血糖小鼠潰瘍的療效及機理，剖析臨床糖尿病病人潰瘍面的超微結構的變化。
　　方法：構建高血糖小鼠潰瘍模型，昆明種小鼠40只，按隨機數(shù)字表抽取10只為正常對照組(喂養(yǎng)普通飼料)，其余小鼠在高脂高糖飲食的誘導下，四周后夜間禁食12h，空腹腹腔注射STZ溶液，正常組注射檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液，STZ注射7天后檢測，夜間禁食不禁水，小鼠尾靜脈取血，空腹血糖＞

2、16.7mmol/L造模成功，血糖穩(wěn)定一周后，每組小鼠均在背部單側制造直徑約6mm的皮膚潰瘍模型，并記為第0天。其余30只，按隨機數(shù)字表分為高血糖組（H組）、高血糖酸性成纖維細胞生長因子治療組（HF組）、高血糖+阻滯劑組（HP組），每組10只。于第3、6、9天評估各組小鼠的創(chuàng)面愈合率，HE染色觀察肉芽組織的厚度，免疫組化檢測CD34、VEGF、ERK、FGFR的表達。采用Western blot法檢測FGFR、ERK在創(chuàng)傷組織中的表達，

3、RT-PCR法檢測FGFR、VEGF的表達。選取兩個糖尿病患者潰瘍面的正常組織，戊二醛固定，做透射電鏡，觀察細胞器的變化。
　　結果：HF組的創(chuàng)面愈合率明顯高于H組(P<0.05)，且接近于正常潰瘍組織的創(chuàng)面愈合率，HP組的創(chuàng)面愈合率低于H組與HF組(P<0.05)。免疫組化中：CD34和VEGF的表達HF組高于H組，接近于C組，HP組明顯低于C組和H組(P<0.05)；ERK和FGFR的表達HF組高于H組、HP組的表達低于H組和

4、HF組(P<0.05)，ERK的變化早于FGFR的變化，有可能是PD98059阻滯了ERK的作用，F(xiàn)GFR的變化稍遲一些。蛋白印跡檢測的ERK和FGFR的情況與免疫組化檢測的這兩項指標基本一致。RT-PCR檢測的FGFR和VEGF與Western Blot檢測的FGFR、免疫組化檢測的VEGF基本一致。外用酸性成纖維細胞生長因子對潰瘍的作用，隨時間變化作用增強，注射ERK抑制劑PD98059后，對創(chuàng)面的作用隨時間也在增強，抑制的作用也越

5、明顯。兩例臨床病例分析得出，其中1例粗面內質網稍有擴張，另1例線粒體部分膜和嵴消失或融合。
　　結論：酸性成纖維細胞生長因子促進高血糖小鼠潰瘍的愈合，F(xiàn)GF可以促進VEGF的表達，注射了ERK的抑制劑PD98059后，在一定程度上抑制了潰瘍面的愈合，并抑制了VEGF的表達，F(xiàn)GF的信號通路和VEGF的信號通路在ERK這條通路上重合，而且作用強，可能兩者的信號通路也有不同，為進一步探討糖尿病潰瘍愈合的機制奠定了基礎。兩個臨床病例得出