利用轉基因和基因剔除技術研究KIF18A和Adiponectin基因功能.pdf

1、本研究通過對PLAGl轉基因小鼠轉基因插入位點進行鑒定，首次發(fā)現(xiàn)轉基因插入小鼠2號染色體基因組后，引起KIFl8A基因缺失，發(fā)現(xiàn)該基因缺失導致雄性小鼠不育，并對其可能的機制進行了研究；利用同源重組技術構建成功KIFl8A全基因打靶質粒并獲得了同源重組ES細胞克隆。 　　本研究通過向受精卵導入外源轉基因DNA序列后，轉基因序列可能隨機的插入小鼠基因組的任意位置，其中約5-10％的轉基因插入位點位于小鼠的一個內源性基因內，導致這些基因的斷

2、裂或缺失而表達喪失或表型異常。這種情況下，轉基因作為斷裂或缺失基因的分子標記物，為區(qū)分突變性表型缺陷和潛在的遺傳性缺陷提供了一種直接的方法。所以用轉基因插入突變分離有趣表型相關新基因并對其功能進行進一步研究不失為一種有效的方法。 　　本研究同時設計構建了KIFl8A全基因剔除打靶質粒，通過ES細胞打靶，獲得了兩個同源重組ES細胞克隆，期望建立KIFl8A定位剔除基因小鼠模型，對其功能進行更深入研究。 　　本論文課題還建立了脂肪特異分