CODIS系統(tǒng)三個miniSTR熒光標(biāo)記復(fù)合擴(kuò)增的構(gòu)建及法醫(yī)學(xué)應(yīng)用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:對TH01、TPOX、CSF1PO三個基因座PCR-miniSTR和普通引物PCR-STR的結(jié)果進(jìn)行一致性檢驗(yàn)；構(gòu)建TH01、TPOX、CSF1PO三個基因座miniSTR熒光標(biāo)記復(fù)合擴(kuò)增體系：對該熒光標(biāo)記復(fù)合擴(kuò)增體系進(jìn)行法醫(yī)學(xué)應(yīng)用性研究。 方法:參照Bulter等對TH01、TPOX、CSF1PO三個基因座miniSTR的引物設(shè)計，選用本教研室提供的123例無血緣關(guān)系個體的血樣，進(jìn)行TH01、TPOX、CSF1PO三個基因

2、座PCR-miniSTR銀染檢測，檢測結(jié)果與商品化試劑盒的檢測結(jié)果進(jìn)行一致性檢驗(yàn)；采用國產(chǎn)DNA聚合酶構(gòu)建miniSTR熒光標(biāo)記復(fù)合擴(kuò)增體系，用美國ABI-310基因分析儀進(jìn)行檢測；對該熒光標(biāo)記復(fù)合擴(kuò)增體系的靈敏度、準(zhǔn)確性、種屬特異性、不同退火溫度下復(fù)合擴(kuò)增的效果、陳舊血痕DNA的檢測等進(jìn)行研究。 結(jié)果:123例無血緣關(guān)系個體的TH01、TPox、CSF1PO三個基因座PCR-miniSTR銀染檢測結(jié)果與商品化試劑盒檢測結(jié)果一致；

3、成功建立了TH01、TPOX、CSF1PO三個基因座miniSTR熒光標(biāo)記復(fù)合擴(kuò)增體系，該體系的的退火溫度范圍較寬，以60℃為最佳，檢測靈敏度為0.25ng模板DNA，擴(kuò)增準(zhǔn)確性高，具有較高的種屬特異性，可以應(yīng)用于陳舊血痕DNA檢測。 結(jié)論:TH01、TPOX、CSF1PO三個基因座PCR-miniSTR結(jié)果可以與該三個基因座普通引物PCR-STR的結(jié)果進(jìn)行比對，具有數(shù)據(jù)庫兼容性；該熒光標(biāo)記復(fù)合擴(kuò)增體系可應(yīng)用于ABI-310檢測平

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