杜氏鹽藻基因組文庫的構建.pdf

1、杜氏鹽藻屬綠藻門綠藻綱團藻目，是一種生長在海水或鹽湖的嗜鹽性浮游單細胞真核綠藻，不具細胞壁，細胞呈梨形或橢圓形，胞內有一個大的杯狀葉綠體，有雙鞭毛，可以在水中游動。該藻突出優(yōu)點在于耐鹽能力強，抗逆性極佳，可在0.05-5M的鹽水中生長，是迄今所發(fā)現(xiàn)的最耐鹽的生物之一。杜氏鹽藻由于其極其耐鹽的能力，簡單的細胞結構以及便利的培養(yǎng)條件而成為研究鹽適應性分子機制的重要模式生物和遺傳學研究的良好材料。杜氏鹽藻作為宿主表達外源基因，生產有用的外源蛋

2、白，具有繁殖速度快、培養(yǎng)簡單、表達產物下游純化過程簡單等優(yōu)越性。 基因組文庫是進行基因組研究的基礎工作之一，其主要應用于重要基因的克隆，基因的轉錄和調控的研究，探索基因的結構和組成，基因組物理圖譜的構建及基因組的測序。 隨著基因工程技術的迅速發(fā)展，人們對生物體基因的結構、功能、表達及其調控機理的研究深入到分子水平，從而使得特定基因片段的分離和獲得成為可能?；蚪M文庫是含有某種生物體全部基因的隨機片段的重組DNA克隆群體。

3、 通過克隆基因組DNA片段可構建基因組文庫，這些DNA片段是由限制性內切酶對高分子質量基因組DNA部分酶切而獲得，理論上講目的基因組中的每一個DNA序列都應在重組克隆文庫中按比例呈現(xiàn)，但事實并非如此，相反在基因組文庫中，一些DNA序列完全丟失，而另一些序列卻被過度呈現(xiàn)。 基因組文庫的類型是由其選用的載體所決定的，而在基因組文庫構建中影響載體選擇的主要因素是目標區(qū)域的大小與載體的容量、文庫篩選的難易程度、載體的設計是否適合