東方擬無枝酸菌產(chǎn)聚乳酸降解酶和蛋白酶的研究.pdf

1、隨著世界社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，由石油等化石資源合成的高分子化合物制品的大量生產(chǎn)、消費(fèi)及遺棄等所引起的環(huán)保問題目趨嚴(yán)重，人們的環(huán)境保護(hù)意識日趨強(qiáng)烈。為了解決合成樹脂和纖維不易被環(huán)境分解的問題，生物可降解高分子材料逐漸成為研究的熱點(diǎn)，其中聚乳酸被認(rèn)為是一種最有前途的可降解高分子化合物。與聚乳酸的合成相比，有關(guān)其生物降解的研究卻相對滯后。PLA在自然界中降解緩慢，已發(fā)現(xiàn)的降解微生物及所產(chǎn)降解酶數(shù)量種類有限，且具有一定的特殊性，這在一定程度上制約了P

2、LA生物降解機(jī)理的闡明，也限制了可控降解材料的開發(fā)推廣和應(yīng)用。 本論文的主要工作是從自然環(huán)境中篩選得到了一株可以高效降解聚乳酸的菌株。經(jīng)過菌種鑒定，確定此菌株為放線菌屬的東方擬無枝酸菌。研究了不同的誘導(dǎo)物對于該菌產(chǎn)聚乳酸降解酶活性的影響，得出明膠為最佳的誘導(dǎo)物之一。由于明膠也是該菌產(chǎn)生蛋自酶的誘導(dǎo)物，在誘導(dǎo)培養(yǎng)65小時(shí)后，其蛋白酶產(chǎn)生量達(dá)到最高值，發(fā)酵液中蛋白酶活最高可達(dá)29，000U/L。雖然蛋白酶酶活和聚乳酸降解酶酶活最高峰

3、出現(xiàn)的時(shí)間稍有不同，但兩者活性均隨誘導(dǎo)時(shí)間而增加，說明蛋白酶活性和聚乳酸降解酶活性的產(chǎn)生具有一定的相關(guān)性；同時(shí)，對發(fā)酵粗酶液的基本酶學(xué)性質(zhì)進(jìn)行了研究，誘導(dǎo)酶系表現(xiàn)出的蛋白酶活性和聚乳酸降解酶活性，均在堿性pH范圍內(nèi)具有較高的活性和穩(wěn)定性，從而顯示聚乳酸降解活性與蛋白酶活性間存在某種內(nèi)在的聯(lián)系。 進(jìn)一步對菌株的胞外酶系進(jìn)行了分析，純化得到了五個(gè)蛋自酶組分，其中三個(gè)具有聚乳酸降解活性，分別為PLAaseⅠ PLAaseⅡ和PLAas