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文檔簡介
1、研究背景:長期的紫外線作用會破壞皮膚屏障,使皮膚出現(xiàn)結(jié)構(gòu)功能的改變和衰老樣外觀。脂肪干細胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)作為一種成體基質(zhì)干細胞,具有多胚層、多譜系分化潛能,可分泌多種促生長因子進而調(diào)控鄰近受損細胞,研究表明脂肪干細胞條件培養(yǎng)基(adipose-derived stemcell-conditioned medium,ADSC-CM)可在一定程度上修復(fù)紫外損傷,刺激蛋白的合成,本研究對A
2、DSC-CM促進UVB損傷后相關(guān)膠原蛋白表達的作用進行更加深入地研究,在蛋白層面為ADSCs的研究提供依據(jù)。
實驗?zāi)康?通過比較UVB照射后經(jīng)ADSC-CM處理和未經(jīng)ADSC-CM處理的HDFs中膠原蛋白表達量隨培養(yǎng)時間的變化情況,探究UVB照射對HDFs內(nèi)Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白表達的損傷效應(yīng)及ADSC-CM對UVB損傷后HDFs內(nèi)Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白表達的促進作用與處理時間和細胞代數(shù)的關(guān)聯(lián)性。
實驗方法:1.體外培養(yǎng)獲取不同
3、代數(shù)的HDFs;2.提取ADSCs進行細胞培養(yǎng)和鑒定,制備ADSC-CM;3.UVB照射不同代數(shù)HDFs,用適宜濃度的DMEM及ADSC-CM分別培養(yǎng)UVB損傷后的HDFs,設(shè)對照組,于培養(yǎng)24h,48h,72h后提取蛋白;4.檢測各組Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白表達量。
實驗結(jié)果:UVB組P5、P15 HDFs中Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白表達量隨照射后培養(yǎng)時間延長而降低,P28蛋白表達量趨近于零,各時間點無統(tǒng)計學(xué)差異;UVB+ADSC-CM組P5
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