硫化氫對(duì)肥胖小鼠肝脂質(zhì)蓄積的影響.pdf

1、背景：硫化氫在肝臟的生理和病理生理方面有重要的作用，然而硫化氫對(duì)肝細(xì)胞脂質(zhì)代謝的影響還不清楚。
　　目的：研究外源性硫化氫對(duì)肥胖小鼠肝脂質(zhì)蓄積的影響。
　　方法：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物采用C57BL/6J小鼠，隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組、硫化氫干預(yù)組。對(duì)照組飼喂普通飼料，模型組和硫化氫干預(yù)組飼喂高脂飼料。從第13周開(kāi)始，硫化氫干預(yù)組注射硫化氫供體硫氫化鈉，劑量為50μmol·kg-1·d-1，模型組注射等量生理鹽水，16周末實(shí)驗(yàn)結(jié)束處死動(dòng)物。

2、處死動(dòng)物時(shí)稱(chēng)取小鼠肝臟、白色脂肪、棕色脂肪重量；檢測(cè)血漿中ALT、AST含量；肝臟組織勻漿后取上清做生化檢測(cè)，檢測(cè)各組小鼠肝組織中甘油三酯、膽固醇含量以及氧化應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)；肝臟石蠟切片做H&E染色觀(guān)察肝組織一般形態(tài)；冷凍切片，油紅染色觀(guān)察肝組織脂質(zhì)蓄積情況；肝臟新鮮冰凍組織提取 RNA，PCR檢測(cè)小鼠肝臟中CPT-1、FAS的基因表達(dá)情況，并用ELISA法檢測(cè)CPT-1、FAS的活性。Western Blotting檢測(cè)小鼠肝臟中CBS

3、、CSE、3-MST蛋白的變化。
　　結(jié)果：與對(duì)照組相比，模型組、硫化氫干預(yù)組小鼠體重明顯增高。與模型組相比，硫化氫干預(yù)組小鼠體重降低，肝組織內(nèi)甘油三酯、膽固醇含量明顯下降；小鼠肝臟質(zhì)量、白色脂肪質(zhì)量、棕色脂肪質(zhì)量以及肝臟指數(shù)、白色脂肪指數(shù)明顯降低。對(duì)照組小鼠肝組織結(jié)構(gòu)基本正常，HE染色結(jié)果顯示，肝小葉結(jié)構(gòu)正常，中央靜脈和肝血竇清晰；模型組小鼠肝組織結(jié)構(gòu)破壞，可見(jiàn)肝小葉不清，肝索紊亂，肝竇狹窄，肝細(xì)胞內(nèi)有大量脂肪空泡；經(jīng)硫化氫干預(yù)

4、后，硫化氫干預(yù)組小鼠肝小葉結(jié)構(gòu)仍保持基本正常，肝竇清晰，肝細(xì)胞內(nèi)脂肪空泡明顯減少。油紅O染色后結(jié)果顯示，高脂組小鼠肝細(xì)胞和細(xì)胞間隙有大量脂滴彌漫沉積，硫化氫干預(yù)組脂滴明顯減少；與模型組相比，硫化氫干預(yù)組小鼠肝臟CPT-1表達(dá)及活性增高，F(xiàn)AS表達(dá)及活性降低；與對(duì)照組相比，模型組小鼠肝臟CBS、CSE蛋白表達(dá)增高，經(jīng)硫化氫干預(yù)后，CBS、CSE蛋白表達(dá)降低。
　　結(jié)論：1.外源性硫化氫對(duì)高脂飲食誘導(dǎo)肥胖小鼠脂肪肝有治療作用。