丙酸睪酮增加大鼠發(fā)育早期腦內(nèi)DA及其代謝產(chǎn)物和分解代謝酶的表達(dá).pdf

1、在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育過程當(dāng)中，雄激素起著十分重要的作用。基于抽動(dòng)穢語綜合征（Tourette’s syndrome，TS）多發(fā)于男童、抗雄激素治療能夠顯著減輕TS抽動(dòng)癥狀、給予外源性雄激素加劇抽動(dòng)，以及TS患者腦內(nèi)存在多巴胺能神經(jīng)體系功能活動(dòng)增強(qiáng)的事實(shí)，推測(cè)其發(fā)病可能與體內(nèi)雄激素水平的紊亂導(dǎo)致多巴胺（dopamine，DA）能神經(jīng)體系的功能障礙有關(guān)。因此，本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)發(fā)育早期乳鼠皮下注射雄激素制劑-丙酸睪酮，建立高雄激素水平的動(dòng)物模型；

2、利用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（LC-MS/MS）、實(shí)時(shí)定量PCR以及免疫印跡方法，觀察TP處理后雄性大鼠反映中腦多巴胺能神經(jīng)元功能狀態(tài)的標(biāo)志物DA及其分解代謝酶MAOA、MAOB和COMT的表達(dá)變化，探討雄激素對(duì)大鼠發(fā)育過程中腦DA能神經(jīng)元功能狀態(tài)的影響，期望所獲結(jié)果為TS的發(fā)病機(jī)制提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　目的：探討丙酸睪酮對(duì)大鼠發(fā)育早期腦內(nèi)DA及其代謝產(chǎn)物和分解代謝酶表達(dá)的影響。
　　方法：將5日齡雄性Wistar乳鼠60只隨

3、機(jī)分為3組，即3周齡組（3-week）、7周齡組（7-week）和6月齡組（6-month），每組20只。各組乳鼠又分為正常對(duì)照組（Con）、丙酸睪酮組（testosterone propionate， TP）、氟他胺組（Flutamide，F(xiàn)lu）、氟他胺預(yù)處理丙酸睪酮組（Flu+TP），各5只乳鼠。TP組大鼠從生后第7天開始通過背部皮下注射TP（0.5mg/只），每天一次，持續(xù)14天。Flu組大鼠生后第7天開始背部皮下注射Flu（5

4、0mg/kg）。Flu+TP組大鼠給藥時(shí)間和劑量與TP組及Flu組大鼠一致，先給予Flu皮下注射后1小時(shí)再給予TP皮下注射。對(duì)照組大鼠給予等體積的芝麻油。相應(yīng)組別大鼠分別在生后3周、7周及6月處死取材。利用LC-MS/MS、實(shí)時(shí)定量PCR以及免疫印跡觀察各組大鼠所取樣本DA及其代謝產(chǎn)物DOPAC、HVA和分解代謝酶MAOA，MAOB，COMT的變化。
　　結(jié)果：⑴與Con組相比，3周齡TP組大鼠尾殼核DA、DOPAC和HVA的含量

5、顯著增加（P<0.01）；Flu組及Flu+TP組大鼠無明顯變化（P>0.05）。與TP組相比，F(xiàn)lu+TP組顯著降低（P<0.01）。與Flu組相比，F(xiàn)lu+TP組大鼠無明顯變化（P>0.05）。與Con組相比，7周齡TP組大鼠尾殼核DA、DOPAC和HVA的含量顯著增加（P<0.01）；Flu組及Flu+TP組無明顯變化（P>0.05）。與TP組相比，F(xiàn)lu+TP組顯著降低（P<0.01）。與Flu組相比，F(xiàn)lu+TP組大鼠無明顯變

6、化（P>0.05）。⑵與Con組相比，3周齡TP組大鼠伏核DA、DOPAC和HVA的含量顯著增加（P<0.01）；Flu組及 Flu+TP組大鼠無明顯變化（P>0.05）。與TP組相比，F(xiàn)lu+TP組顯著降低（P<0.01）。與Flu組相比，F(xiàn)lu+TP組大鼠無明顯變化（P>0.05）。與Con組相比，7周齡TP組大鼠伏核DA、DOPAC和HVA的含量顯著增加（P<0.01）；Flu組及Flu+TP組無明顯變化（P>0.05）。與TP組

7、相比，F(xiàn)lu+TP組顯著降低（P<0.01）。與Flu組相比，F(xiàn)lu+TP組大鼠無明顯變化（P>0.05）。⑶與Con組相比，3周齡TP組黑質(zhì)MAOA、MAOB和COMT的 mRNA的表達(dá)顯著增加（P<0.01）；Flu組及Flu+TP組無明顯變化（P>0.05）。與TP組相比，F(xiàn)lu+TP組顯著降低（P<0.01）。與Flu組相比，F(xiàn)lu+TP組大鼠黑質(zhì)無明顯變化（P>0.05）。與Con組相比，7周齡TP組黑質(zhì)MAOA、MAOB和C

8、OMT的mRNA表達(dá)顯著增加（P<0.01）；Flu組及 Flu+TP組無明顯變化（P>0.05）。與TP組相比，F(xiàn)lu+TP組顯著降低（P<0.01）。與Flu組相比，F(xiàn)lu+TP組無明顯變化（P>0.05）。⑷與Con組相比，3周齡TP組腹側(cè)被蓋區(qū)MAOA、MAOB和COMT的 mRNA表達(dá)顯著增加（ P<0.01）；Flu組及 Flu+TP組無明顯變化（P>0.05）。與TP組相比，F(xiàn)lu+TP組表達(dá)顯著降低（P<0.05）。與F

9、lu組相比，F(xiàn)lu+TP組無明顯變化（P>0.05）。與Con組相比，7周齡TP組腹側(cè)被蓋區(qū)MAOA、MAOB和COMT的 mRNA表達(dá)顯著增加（ P<0.01）；Flu組及 Flu+TP組無明顯變化（P>0.05）。與TP組相比，F(xiàn)lu+TP組顯著降低（P<0.05）。與Flu組相比， Flu+TP組無明顯變化（P>0.05）。⑸與Con組相比，3周齡TP組尾殼核MAOA、MAOB、MB-COMT和S-COMT的表達(dá)顯著增加（ P<0

10、.01）；Flu組及 Flu+TP組無明顯變化（P>0.05）。與TP組相比，F(xiàn)lu+TP組顯著降低（P<0.01）；與Flu組相比， Flu+TP組無明顯變化（P>0.05）。與Con組相比，7周齡TP組尾殼核MAOA、MAOB、MB-COMT和S-COMT的表達(dá)顯著增加（ P<0.01）；Flu組及 Flu+TP組無明顯變化（P>0.05）。與TP組相比，F(xiàn)lu+TP組顯著降低（P<0.01）；與Flu組相比， Flu+TP組無明顯

11、變化（P>0.05）。⑹與Con組相比，3周齡TP組伏核MAOA、MAOB、MB-COMT和S-COMT的表達(dá)顯著增加（ P<0.01）；Flu組及 Flu+TP組無明顯變化（P>0.05）。與TP組相比，F(xiàn)lu+TP組顯著降低；與Flu組相比，F(xiàn)lu+TP組無明顯變化（P>0.05）。與Con組相比，7周齡TP組伏核MAOA、MAOB、MB-COMT和S-COMT的表達(dá)顯著增加（ P<0.01）；Flu組及 Flu+TP組無明顯變化（