歐李（Prunus humilis Bunge）自交不親和性及S基因的克隆.pdf

1、自交不親和性是被子植物預(yù)防近親繁殖和保持遺傳變異的一種重要機(jī)制，這一機(jī)制在植物界中普遍存在。許多果樹(shù)如蘋(píng)果、梨、杏、櫻桃等都存在自交不親和現(xiàn)象。由于自交不親和是植物生殖過(guò)程中的一個(gè)重要現(xiàn)象，因此它已成為果樹(shù)及其它植物研究的熱點(diǎn)。歐李屬薔薇科櫻桃屬，為我國(guó)所特有植物，有巨大的應(yīng)用價(jià)值。目前，歐李的研究主要集中在栽培、選種、果實(shí)營(yíng)養(yǎng)特性分析等方面，而有關(guān)其育性問(wèn)題的研究鮮有報(bào)道。本論文以50株野生歐李為試材，先對(duì)其育性問(wèn)題進(jìn)行了研究，確定其

2、為自交不親和；證明了歐李自交不親和性是受S基因控制的；同時(shí)克隆鑒定出了與其相關(guān)的自交不親和基因；發(fā)現(xiàn)并鑒定了歐李的四種S基因型。具體結(jié)果如下：1.以坐果率作為自交親和與否的指標(biāo)，用傳統(tǒng)田間自交授粉的方法對(duì)50株野生歐李試材進(jìn)行自交授粉實(shí)驗(yàn)。調(diào)查結(jié)果顯示，所研究的50株野生歐李的自交座果率(3.72％)遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于歐李雜交座果率(30％以上)，由此確定歐李為自交不親和。 2.以坐果率作為雜交親和與否的指標(biāo)，用傳統(tǒng)田間雜交授粉的方法確定

3、了歐李自交不親和是受S基因控制的。 3.根據(jù)核果類(lèi)S-RNase的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)在C1區(qū)上游和C2區(qū)設(shè)計(jì)通用引物，以50株野生歐李的親本，即12株野生歐李為試材，對(duì)其基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，首次得到了歐李的7條S基因的部分序列(包括C1、C2保守區(qū))，將其分別命名為S1、S2、S3、S4、S5、S6和S7。為了得S基因全序列，我們根據(jù)這6條S基因的核苷酸序列(S5除外)分別設(shè)計(jì)一條正向特異引物，與在C5保守區(qū)設(shè)計(jì)的一條反向通用引物