甘藍(lán)型油菜自交不親和性的初步研究.pdf

1、甘藍(lán)型油菜(Brassica napus,AACC,2n=38)是由自交不親和的白菜(Brassica rapa,AA,2n=20)和甘藍(lán)(Brassica oleracea,BB,2n=18)天然雜交自然加倍而來(lái),表現(xiàn)自交親和。已有研究表明,自交不親和基因(S單元型)廣泛存在于甘藍(lán)型油菜中,其自交親和的分子機(jī)制十分復(fù)雜,目前尚不清楚。
　　 本研究以甘藍(lán)型油菜自交不親和系S-1300和125份來(lái)自國(guó)內(nèi)外的普通甘藍(lán)型油菜為材料,

2、研究甘藍(lán)型油菜自交不親和性的遺傳機(jī)理；利用同源序列法發(fā)展自交不親和性的分子標(biāo)記和克隆自交不親和基因:分析甘藍(lán)型油菜S位點(diǎn)的分布與自交不親和性的恢保材料的關(guān)系。主要結(jié)果如下:
　　 1.調(diào)查S-1300×Defender和S-1300×育9兩個(gè)雜交組合的F2和BC1群體,以及群體中86個(gè)單株自交后代的親和性分離,說(shuō)明甘藍(lán)型油菜S-1300的自交不親和性受隱性的單位點(diǎn)控制。
　　 2.利用發(fā)表的研究蕓薹屬自交不親和性的7對(duì)引

3、物,發(fā)展了1個(gè)與自交親和性完全連鎖的SCAR標(biāo)記,1個(gè)與自交不親和性完全連鎖的CAPS標(biāo)記。
　　 3.根據(jù)同源序列法得到6個(gè)顯性的SCAR標(biāo)記,其中3個(gè)標(biāo)記與自交親和性完全連鎖,另外3個(gè)標(biāo)記與自交不親和性完全連鎖。獲得2個(gè)多重PCR標(biāo)記,能夠區(qū)分3種基因型,用于輔助選擇自交不親和表型,無(wú)錯(cuò)判單株。
　　 4.將S位點(diǎn)定位在兩個(gè)甘藍(lán)型油菜遺傳圖譜的N7連鎖群上。
　　 5.克隆到S-1300的SRK和SP11的大

4、部分片段。S-1300的SRK長(zhǎng)5892bp,GENESCAN預(yù)測(cè)具有7個(gè)外顯子和6個(gè)內(nèi)含子。S-1300的SP11長(zhǎng)435bp,與Ⅱ類SP11的同源性最高。S-1300含有2個(gè)Ⅱ類S單元型,A基因組上的S單元型決定自交不親和性。
　　 6.克隆到Defender的SRK的大部分片段和SLG。Defender的SRK片段長(zhǎng)度為4281bp,來(lái)自于Ⅱ類甘藍(lán)S單元型?？寺〉腟LG片段長(zhǎng)1336 bp,來(lái)自于Ⅰ類白菜S單元型。Defe

5、nder含有1個(gè)Ⅰ類S單元型和1個(gè)Ⅱ類S單元型。
　　 7.分析蕓薹屬三個(gè)S位點(diǎn)基因,SLG、SRK和SP11的進(jìn)化。聚類結(jié)果表明Ⅰ類和Ⅱ類S單元型先分化,然后是S位點(diǎn)基因分化,最后是蕓薹屬種間分化。
　　 8.調(diào)查S-1300與來(lái)自國(guó)內(nèi)外的125份普通甘藍(lán)型油菜雜交目的自交不親和性,將這些材料分成自交不親和性的恢復(fù)系和保持系兩類。
　　 9.在自交不親和系S-1300和125份甘藍(lán)型油菜中鑒定了2個(gè)Ⅰ類S單元型

6、(s-ISLGa和S-ISLGb)和4個(gè)Ⅱ類S單元型(S-ⅡSLGa,S-ⅡSLGb,S-ⅡSP11a和S-ⅡSP11b)。S-ISLGa來(lái)自Ⅰ類白菜S-47,S-ISLBb來(lái)自Ⅰ類白菜S-21。S-ⅡSLGa包含來(lái)自于Ⅱ類甘藍(lán)S-15的S-ⅡSLGb。S-ⅡSP11a和S-ⅡSP11b是新鑒定的兩個(gè)Ⅱ類S單元型。
　　 10.將自交不親和系S-1300和125份甘藍(lán)型油菜的基因型分成11類。S-1300具有基因型AⅡAⅡCⅡC