睡眠剝奪致大鼠空間學(xué)習(xí)記憶障礙的LTP機(jī)制及谷維素多維B干預(yù)作用研究.pdf

1、睡眠障礙會(huì)影響人類的工作和生活。長(zhǎng)期睡眠剝奪(sleepdeprivation，SD)可影響動(dòng)物或人的發(fā)育，免疫功能，并可導(dǎo)致學(xué)習(xí)記憶能力受損。許多學(xué)者對(duì)于睡眠與學(xué)習(xí)記憶關(guān)系進(jìn)行了深入的研究，并提供了大量的實(shí)驗(yàn)證據(jù)，但是睡眠障礙導(dǎo)致學(xué)習(xí)記憶下降的確切機(jī)制至今未能完全闡明。 本研究針對(duì)睡眠障礙影響空間學(xué)習(xí)記憶功能機(jī)制及干預(yù)措施響進(jìn)行了研究。主要采用神經(jīng)行為和電生理方法尤其是腦片膜片鉗技術(shù)研究了睡眠剝奪致大鼠空間學(xué)習(xí)記憶障礙的LT

2、P機(jī)制及谷維素多維B的干預(yù)作用。 第一部分：采用側(cè)腦室注射對(duì)氯苯丙胺酸(PCPA)及阿托品的方法制作大鼠睡眠障礙的模型，并連續(xù)同步采集腦電、肌電、眼電，以30s為一分段時(shí)間，按照時(shí)頻分析理論，以VisualBasic語(yǔ)言自編程序自動(dòng)分析腦電，同時(shí)綜合分析肌電、眼電，按睡眠-覺(jué)醒周期分類方法對(duì)模型進(jìn)行鑒定。結(jié)果如下：睡眠剝奪組每24h內(nèi)睡眠總時(shí)間、NREM時(shí)間、REM時(shí)間短于對(duì)照組；而每24h內(nèi)覺(jué)醒時(shí)間睡眠剝奪組長(zhǎng)于對(duì)照組。說(shuō)明

3、睡眠剝奪模型建立成功。 第二部分：采用Morris水迷宮檢測(cè)對(duì)照組和模型組大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力；采用腦片膜片鉗全細(xì)胞記錄技術(shù)在單個(gè)細(xì)胞水平研究睡眠剝奪對(duì)大鼠海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞的長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)效應(yīng)(LTP)的影響，同時(shí)采用細(xì)胞內(nèi)標(biāo)記技術(shù)對(duì)細(xì)胞形態(tài)進(jìn)行確認(rèn)。結(jié)果如下： 1.空間學(xué)習(xí)記憶的檢測(cè)：定位航行實(shí)驗(yàn)中模型組大鼠找到原平臺(tái)的時(shí)間(潛伏期)長(zhǎng)于對(duì)照組；空間探索實(shí)驗(yàn)中模型組大鼠穿過(guò)原平臺(tái)的次數(shù)明顯少于對(duì)照組。說(shuō)明模型組的

4、空間學(xué)習(xí)記憶成績(jī)比對(duì)照組差。 2.LTP的檢測(cè)：(1)使用低頻刺激為條件刺激，同時(shí)將細(xì)胞鉗制在-50mv，以此方法誘導(dǎo)由NMDA受體介導(dǎo)的LTP(能為APV阻斷)，結(jié)果顯示模型組很難誘導(dǎo)出由NMDA受體介導(dǎo)的LTP，而對(duì)照組易誘出；(2)采用低頻刺激為條件刺激，同時(shí)將細(xì)胞鉗制在-30mv，以此方法誘導(dǎo)由非NMDA受體介導(dǎo)的LTP(不能為APV阻斷)誘導(dǎo)由非NMDA受體介導(dǎo)的LTP時(shí)兩組未見(jiàn)明顯差別。提示睡眠剝奪對(duì)學(xué)習(xí)記憶的影響

5、的機(jī)制與抑制NMDA受體介導(dǎo)的LTP誘出有關(guān)。 第三部分：對(duì)大鼠睡眠剝奪模型給予腹腔注射谷維素和維生素B1,B2,B6,B12(治療組)進(jìn)行干預(yù)，然后同樣對(duì)大鼠的睡眠進(jìn)行定量，對(duì)空間學(xué)習(xí)記憶能力以及海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞的LTP進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果如下： 1.睡眠檢測(cè)：治療組每24h內(nèi)睡眠總時(shí)間、NREM時(shí)間、REM時(shí)間均明顯長(zhǎng)于假治療組；治療組每24h內(nèi)覺(jué)醒時(shí)間明顯短于假治療組。說(shuō)明采用谷維素多維B能有效的促眠。

6、 2.空間學(xué)習(xí)記憶的檢測(cè)：定航實(shí)驗(yàn)中治療組大鼠找到原平臺(tái)的時(shí)間(潛伏期)短于假治療組；空間探索實(shí)驗(yàn)中治療組大鼠穿過(guò)原平臺(tái)的次數(shù)明顯多于假治療組。說(shuō)明通過(guò)谷維素多維B改善睡眠可以提高空間學(xué)習(xí)記憶成績(jī)。 3.LTP的檢測(cè)：治療組易誘導(dǎo)出由NMDA受體介導(dǎo)的LTP，而假治療組則很難誘出；由非NMDA受體介導(dǎo)的LTP誘出率兩組也沒(méi)有明顯差別。提示通過(guò)谷維素多維B改善睡眠可以提高空間學(xué)習(xí)記憶成績(jī)其機(jī)理與提高NMDA受體介導(dǎo)的LTP的誘出