介導(dǎo)神經(jīng)遞質(zhì)釋放的SNARE復(fù)合體調(diào)控神經(jīng)遞質(zhì)γ-氨基丁酸重?cái)z取的機(jī)制研究.pdf

1、神經(jīng)遞質(zhì)釋放到突觸間隙是由SNARE(Soluble N-ethylmaleimide-sensitivefactor attachment proteinreceptor proteins)復(fù)合體的形成介導(dǎo)的。該復(fù)合體由兩個(gè)位于細(xì)胞質(zhì)膜上的定向SNARE蛋白(target-SNARE)syntaxin 1 A和SNAP-25，以及一個(gè)位于囊泡膜上的囊泡SNARE蛋白(vesicle-SNARE)VAMP-2三者組成。定向SNARE蛋白

2、syntaxin 1A和SNAP-25首先形成一個(gè)中間復(fù)合體，被稱為定向SNARE復(fù)合體(target-SNARE complex)，待VAMP-2結(jié)合上來進(jìn)一步形成SNARE復(fù)合體(SNARE complex)。抑制性神經(jīng)遞質(zhì)γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid，GABA)也是通過以上過程被釋放到突觸間隙，與突觸后膜的GABA受體結(jié)合，向突觸后傳遞信號(hào)，GABA轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(GABA transporter)會(huì)重?cái)z取突觸間

3、隙中的GABA以終止突觸的信號(hào)傳遞。已有研究表明定向SNARE蛋白syntaxin 1A可以與位于神經(jīng)元上的GABA轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白GAT-1(GABAtransporter-1)亞型直接結(jié)合，從而抑制它的重?cái)z取功能，然而其它的SNARE蛋白或者SNARE復(fù)合體能否調(diào)節(jié)GABA的重?cái)z取還沒有相關(guān)的報(bào)道。本文運(yùn)用分子克隆、細(xì)胞GABA攝取檢測(cè)、免疫細(xì)胞化學(xué)、免疫共沉淀和熒光共振能量轉(zhuǎn)移測(cè)定等方法，研究了SNARE復(fù)合體對(duì)GAT-1的調(diào)控機(jī)制。研究

4、結(jié)果表明：在syntaxin 1A存在的情況下SNAP-25能夠有效抑制GAT-1的重?cái)z取功能，這種抑制依賴于SNAP-25/syntaxin 1A復(fù)合體即定向SNARE復(fù)合體的形成。Syntaxin 1A的H3結(jié)構(gòu)域被鑒定為結(jié)合SNAP-25和GAT-1的位點(diǎn)。SNAP-25與syntaxin 1A結(jié)合加強(qiáng)了syntaxin 1A與GAT-1的相互作用，從而顯著增強(qiáng)了syntaxin 1A介導(dǎo)的對(duì)GAT-1重?cái)z取功能的抑制。同時(shí)，我們