血清趨化素及腫瘤壞死因子-α水平與2型糖尿病腎臟病的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：糖尿病腎臟?。―iabetic kidney disease,DKD）是糖尿病最常見、最嚴(yán)重的并發(fā)癥之一，其發(fā)病機(jī)制尚未闡明，近年來認(rèn)為炎癥反應(yīng)是DKD發(fā)病的重要原因之一。趨化素（Chemerin）是具有趨化作用的脂肪因子，主要由脂肪組織分泌，其以促炎為主，可募集有其受體表達(dá)的炎性細(xì)胞至腎臟，分泌炎癥介質(zhì)，故而腎臟組織聚集著大量淋巴細(xì)胞、肥大細(xì)胞及巨噬細(xì)胞，腎臟炎癥反應(yīng)加重，腎臟逐漸發(fā)生纖維化。Chemerin可以在一定程度上反映

2、腎臟炎癥反應(yīng)的程度。腫瘤壞死因子-ɑ（Tumor necrosis factor-ɑ,TNF-ɑ）是體內(nèi)重要的炎癥因子，其能誘發(fā)其它炎性細(xì)胞因子的產(chǎn)生和釋放，放大腎臟的炎癥反應(yīng)形成惡性循環(huán)，加快DKD的病情進(jìn)展。本研究主要觀察不同階段DKD患者血清Chemerin和TNF-ɑ水平的變化，旨在揭示其在DKD發(fā)生發(fā)展中的作用。
　　方法：
　　1.選擇2015年3月-2015年12月于河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院內(nèi)分泌一科住院的2型糖尿

3、?。═ype2 diabetes mellitus,T2DM）患者共133例，T2DM均符合1999年WHO診斷標(biāo)準(zhǔn)。DKD納入標(biāo)準(zhǔn)符合《中國(guó)2型糖尿病防治指南》（2013版）。T2DM患者根據(jù)尿微量白蛋白/肌酐（尿A/Cr）水平分為單純T2DM（SDM）組（男<2.5mg/mmol，女<3.5mg/mmol）47例，其中男25例，女22例，年齡57.28±13.60歲，病程9.58±6.37年；微量白蛋白尿（mic-DKD）組(男2.

4、5～30mg/mmol，女3.5～30mg/mmol）41例，其中男21例，女20例，年齡63.02±11.39歲，病程13.68±6.50年；大量白蛋白尿（mac-DKD）組（男、女均>30mg/mmol）45例，其中男28例，女17例，年齡63.16±12.27歲，病程18.13±9.58年。所有患者排除1型糖尿病、感染、妊娠、腫瘤、外傷、冠心病、慢性肝臟疾病、使用血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑及血管緊張素Ⅱ受體阻斷劑者及其他原因引起的腎臟

5、疾病。選取同期在我院體檢者中的正常對(duì)照組（NC組）45名，其中男28名，女17名，年齡60.33±12.78歲，其年齡、性別均與 T2DM組相匹配。本研究經(jīng)河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，受試者均簽署知情同意書。
　　2.收集受試者一般資料，包括性別、年齡、病程和既往史。隔夜禁食10h，次日清晨測(cè)量受試者收縮壓（SBP）、舒張壓（DBP）、身高、體質(zhì)量、計(jì)算體質(zhì)量指數(shù)(BMI)=體質(zhì)量/身高2。
　　3.空腹血糖（F

6、BG）、膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、尿酸（UA）的檢測(cè)：受試者均隔夜禁食10h，晨起取肘靜脈血，應(yīng)用Olympus型號(hào)AU2700全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定。
　　4.超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）的檢測(cè)：采用散射比濁法，應(yīng)用深圳國(guó)賽Omlipo特定蛋白分析儀測(cè)定。糖化血紅蛋白（HbA1c）和尿A/Cr的檢測(cè)：采用免疫比濁法，應(yīng)

7、用德國(guó)西門子DCA2000儀器測(cè)定。
　　5.Chemerin和TNF-ɑ檢測(cè)：所有研究者隔夜禁食10h，清晨空腹抽取靜脈血3ml,采血前避免劇烈活動(dòng)及應(yīng)激等。血標(biāo)本室溫靜置1h，3000r/min離心10min后分離血清，保存于-20℃冰箱中待測(cè)Chemerin、TNF-ɑ。均采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測(cè)定，Chemerin試劑盒由艾博抗（上海）貿(mào)易有限公司提供（批次內(nèi)變異系數(shù)<10％，批次間變異系數(shù)<12%），TNF-ɑ

8、試劑盒由杭州聯(lián)科生物技術(shù)有限公司提供（批次內(nèi)變異系數(shù)<3.8%，批次間變異系數(shù)<5.0%)，嚴(yán)格按照說明書上的步驟進(jìn)行操作。
　　6.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：數(shù)據(jù)處理采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件。對(duì)計(jì)量資料進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)，正態(tài)資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x_±s）表示，非正態(tài)資料用中位數(shù)（四分位數(shù)間距）表示；正態(tài)資料兩組間比較用t檢驗(yàn)，多組間比較用單因素方差分析；非正態(tài)資料用秩和檢驗(yàn)；相關(guān)分析采用pearson或spearman相關(guān)分析；用logis

9、tic多因素回歸分析DKD發(fā)生的危險(xiǎn)因素，以P<0.05定義為入選標(biāo)準(zhǔn)，P>0.10為剔除標(biāo)準(zhǔn)。
　　結(jié)果：
　　1.各組之間臨床和生化指標(biāo)及Chemerin、TNF-ɑ的比較
　　與NC組比較，SDM組的病程，BMI、DBP、FBG、HbA1c、TC、TG、LDL-C、Scr、BUN、尿A/Cr、hs-CRP均升高，HDL-C降低；mic-DKD組的病程、BMI、SBP、WBC、FBG、HbA1c、尿A/Cr、hs-

10、CRP較SDM組和NC組升高，HDL-C降低；DKD兩組內(nèi)比較：mac-DKD組病程、FBG、SBP、HbA1c、尿A/Cr、LDL-C、WBC、hs-CRP高于mic-DKD組，HDL-C低于mic-DKD組。
　　SDM組的血清Chemerin濃度是38.23±5.48ng/ml，高于NC組的34.14±7.54ng/ml（t=2.960，P<0.01）；mic-DKD組的Chemerin濃度是42.69±8.05ng/ml，

11、高于SDM組（t=2.997，P<0.01）和NC組（t=5.084，P<0.01）；mac-DKD組的血清Chemerin水平47.32±9.11ng/ml高于mic-DKD組（t=0.687，P<0.05）、SDM組（t=5.770，P<0.01）和NC組（t=7.473，P<0.01）。
　　SDM組的血清TNF-ɑ濃度是134.42±27.31pg/ml，高于NC組的103.99±20.43pg/ml（t=6.031，P<

12、0.01）；mic-DKD組的TNF-ɑ濃度是165.48±32.63pg/ml，高于SDM組（t=4.861，P<0.01）和NC組（t=10.358，P<0.01）；mac-DKD組的血清TNF-ɑ水平227.53±58.31pg/ml高于mic-DKD組（t=6.159，P<0.05）、SDM組（t=9.738，P<0.01）和 NC組（t=54.647，P<0.01）。
　　2.血清Chemerin、TNF-ɑ與其它指標(biāo)的

13、相關(guān)性分析
　　血清Chemerin與TNF-ɑ(r=0.420)、hs-CRP(r=0.402)、HbA1c(r=0.388)及病程（r=0.365）呈正相關(guān)(均P<0.01)，與HDL-C呈負(fù)相關(guān)（r=-0.394，P＜0.01）；血清TNF-ɑ與尿A/Cr(r=0.623)、HbA1c(r=0.600)，hs-CRP(r=0.569)、Scr（r=0.537）及LDL-C（r=0.502）呈正相關(guān)(均P<0.01)，與HDL

14、-C呈負(fù)相關(guān)（r=-0.533，P＜0.01）。
　　3.DKD發(fā)生的危險(xiǎn)因素
　　以DKD為因變量，性別、年齡、病程、BMI、WBC、hs-CRP、是否存在高血壓、FBG、HbA1c、LDL-C、HDL-C、TNF-ɑ、Chemerin為自變量進(jìn)行l(wèi)ogistic回歸分析。結(jié)果顯示Chemerin（β=0.974，P<0.01）、TNF-ɑ（β=1.812，P<0.01）、WBC（β=1.524，P<0.01）、年齡（β=