脂聯(lián)素、腫瘤壞死因子-α基因多態(tài)性及其血清水平與2型糖尿病遺傳易感性研究.pdf

1、目的：　探討寧夏漢族人群中2型糖尿病的遺傳易感性。通過對國內(nèi)外已證實與2型糖尿病關(guān)聯(lián)的脂聯(lián)素、腫瘤壞死因子-α二個基因多態(tài)性位點作為本課題的候選基因位點，采用分子遺傳學技術(shù)和群體遺傳學統(tǒng)計方法，以明確它們與寧夏漢族人群2型糖尿病的相關(guān)性。逐一驗證的2個候選基因多態(tài)性位點分別為：脂聯(lián)素（ADPN）基因的+45單核苷酸多態(tài)性、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)基因啟動子區(qū)-308位點單核苷酸多態(tài)性；檢測脂聯(lián)素、腫瘤壞死因子-α血清濃度以及相關(guān)的

2、體重指數(shù)、生化指標等。在上述研究基礎(chǔ)上探討在寧夏漢族人群2型糖尿病的發(fā)病過程中ADPN的SNP45位點基因多態(tài)性與肥胖、胰島素抵抗之間的關(guān)聯(lián)性；初步探討ADPN的SNP45位點基因多態(tài)性與血清水平的相關(guān)性；研究2型糖尿病患者中的ADPN血清水平與體重指數(shù)(BMI)、胰島素抵抗指數(shù)、TNF-α等相關(guān)因素的關(guān)系及在糖尿病心血管病變中的作用，探討ADPN、TNF-α基因多態(tài)性在2型糖尿病發(fā)生發(fā)展中的作用及機制。 方法：　采用聚合酶鏈反

3、應(PCR)、限制性片斷長度多態(tài)(RFLP)等分子遺傳學方法，檢測隨機抽取的100例2型糖尿病患者和101例無糖尿病家族史的健康對照中2個候選基因的多態(tài)性；同時測定全部受試對象的體重指數(shù)(BMI)、空腹靜脈血糖(FPG)、血清甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)等生化指標；采用放射免疫法(RIA)，分別測定空腹血清胰島素(FINs)、TNF－α水平；采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA法) 測定血清 ADPN水平；用HOMA胰島素抵抗指數(shù)(HO

4、MA－IR=FPG×FINs/22.5)評價2型糖尿病患者的胰島素抵抗情況。通過Case-Control比較，統(tǒng)計分析這些基因多態(tài)性在2型糖尿病人群和正常人群中的分布特點、這些基因多態(tài)性及其血清水平與寧夏漢族人群中2型糖尿病的關(guān)聯(lián)性。 結(jié)果：對照人群中的2個基因多態(tài)性位點的頻率經(jīng)遺傳平衡定律檢驗，均符合基金項目：國家自然科學基金（30260045），寧夏自然科學基金（A4005）Hardy-Weinberg平衡法則，表明各基因

5、頻率在寧夏漢族人群中已達遺傳平衡，所選擇群體具有群體代表性2型糖尿病組的BMI、空腹血糖、空腹胰島素、甘油三脂、總膽固醇、低密度脂蛋白、膽固醇、Homa-IR等指標水平均高于健康對照組(P<0.05)；血清ADPN、高密度脂蛋白膽固醇均低于健康對照組(P<0.05)；血清TNF-α在兩組間無顯著性差異。2型糖尿病組和健康對照組間基因型和基因分布頻率的比較顯示：ADPN基因中SNP45多態(tài)性G基因的分布頻率在兩組間有顯著性差異(37％ v

6、s 23％, P<0.01)，OR值為1.99，95％ 可信區(qū)間（95％CI）下限為1.28；而TNF-αSNP-308多態(tài)性位點的基因型和基因頻率在2型糖尿病患者與對照組間沒有顯著性差異(P>0.05)。 ADPN-SNP45 GG+TG基因型組與TT基因型組相比，各指標如下：在2型糖尿病組BMI≥25.0kg/m2 組的GG+TG 基因型頻率高于 BMI<25.0kg/m2組，G基因頻率也高于BMI<25.0kg/m2組（

7、P<0.05），GG+TG基因型的HOMA-IR與TT基因型比較，兩組間有顯著性差異（P<0.05），經(jīng)BMI校正后，該差異仍存在（P<0.05）；GG+TG基因型的血清ADPN濃度低于TT基因型，兩組間有顯著性差異（P<0.0 5）。而在正常對照組中，各基因型間BMI、HOMA-IR、血清ADPN濃度無顯著性差異，表明ADPN-SNP45T/G多態(tài)性與超重肥胖、HOMA-IR、血清ADPN水平有一定關(guān)聯(lián)性。在糖尿病患者中BMI≥25.

8、0kg/m2組血清ADPN水平明顯低于BMI<25.0kg/m2 組(F=5.54，P <0.05)，調(diào)整性別、年齡和BMI等混雜因素后，單因素相關(guān)分析顯示：血清ADPN與BMI呈負相關(guān)，（相關(guān)系數(shù)分別為: r =-0.313，P =0.036， P<0.05），與TNF-α等指標無相關(guān)性。 結(jié)論：　ADPN基因SNP+45多態(tài)性與寧夏漢族人群的2型糖尿病相關(guān)，G基因可直接或間接決定2型糖尿病的遺傳易感性；TNF-α基因SNP