大黃素致小鼠瀉劑結(jié)腸形成過程中Cajal間質(zhì)細(xì)胞及SCF-c-kit的動態(tài)變化.pdf

1、目的:擬用單體大黃素建立小鼠瀉劑結(jié)腸模型;觀察瀉劑結(jié)腸形成過程中結(jié)腸傳輸功能、結(jié)腸平滑肌電生理活動的變化、小鼠結(jié)腸大體及組織形態(tài)結(jié)構(gòu)、Cajal間質(zhì)細(xì)胞(Interstitial Cells of Cajal，ICC)數(shù)目、干細(xì)胞因子(Stem Cell Factor，SCF)及c-Kit蛋白的動態(tài)變化。
　　方法:選取健康、雄性昆明（KM）小鼠72只，隨機數(shù)字表法分為空白對照組(control group，C組)和持續(xù)用藥組(p

2、ersistant application group，P組)，每組36只。以含單體大黃素的飼料喂養(yǎng)小鼠，制備瀉劑結(jié)腸小鼠模型。不同時相點分別采用生物機能實驗系統(tǒng)檢測小鼠結(jié)腸平滑肌電活動動態(tài)變化;活性炭懸液推進法測定腸道傳輸功能;肉眼觀察小鼠結(jié)腸大體形態(tài)變化;HE染色觀察小鼠結(jié)腸組織形態(tài)改變;冰凍切片免疫熒光標(biāo)記觀察ICC數(shù)量動態(tài)變化;ELISA測定小鼠血清SCF動態(tài)變化;Western blot法檢測結(jié)腸組織中c-Kit蛋白含量的動態(tài)

3、變化。
　　結(jié)果:1、成功建立模型:利用單體大黃素成功建立小鼠瀉劑結(jié)腸模型，用時12W。用藥2W后P組小鼠毛發(fā)光澤變差，體重增長較C組緩慢。造模完成后P組小鼠較C組體型小，體重輕。造模過程中P組死亡2只。2、小鼠結(jié)腸肌電的變化:P組小鼠結(jié)腸肌電在用藥2W后較C組頻率、振幅及頻率、振幅變異系數(shù)無明顯改變，持續(xù)用藥6W后較C組頻率(C組:19.33±1.74次/min，P組:10.85±0.92次/min)及振幅(C組:0.37±0.

4、01mV，P組:0.22±0.02mV)均明顯下降(P＜0.05)，頻率、振幅變異系數(shù)明顯增高(P＜0.05），12W后P組小鼠較C組結(jié)腸肌電的頻率及振幅處于較低水平。3、小鼠腸道傳輸功能的變化:P組小鼠腸道傳輸功能在造模過程中出現(xiàn)動態(tài)變化。用藥2-4W后腸道傳輸功能（C組:59.4±1.9％，P組:68.8±1.2％）明顯增加（P＜0.05），用藥6-8W后P組小鼠腸道傳輸功能（C組:57.4±0.9％，P組:50.4±2.4％）出現(xiàn)

5、降低(P＜0.05），用藥第10W(P組:60.5±0.9％)后腸道傳輸功能較第8W（P組:50.4±2.4％）時有所加快（P＜0.05），與C組相比較無明顯差異，造模完成后D組小鼠腸道傳輸功能(P組:C組:58.9±0.9％，39.6±1.2％)顯著下降(P＜0.05）。4、小鼠結(jié)腸大體以及HE染色觀察:用藥12W后P組小鼠全結(jié)腸長度及管徑較C組減小;小鼠結(jié)腸HE染色見P組用藥2W后較C組結(jié)腸粘膜厚度變薄，粘膜結(jié)構(gòu)紊亂，粘膜陷凹變淺，

6、肌層無明顯改變;用藥12W后P組小鼠結(jié)腸粘膜水腫明顯，粘膜上皮有脫落現(xiàn)象，粘膜下層有大量炎性細(xì)胞浸潤，肌層無明顯變化。5、小鼠結(jié)腸ICC的數(shù)量變化:P組小鼠結(jié)腸ICC的數(shù)量（C組:10.9±0.7％，P組:7.7±1.0％）在開始應(yīng)用大黃素第6W出現(xiàn)下降，第10-12W(P組:3.2±0.6％)顯著下降(P＜0.05)，處于較低水平。12W內(nèi)C組無明顯動態(tài)變化。6、小鼠血清SCF的動態(tài)變化:P組小鼠血清SCF第4W(C組為:81.3±2

7、.1pg/ml，P組為:71.2±2.5pg/ml)開始下降，第6周(55.8±1.9pg/ml)顯著下降(P＜0.05），第8W后(27.5±3.6pg/ml)持續(xù)處于較低水平。12W內(nèi)C組無明顯動態(tài)變化。7、結(jié)腸組織c-Kit蛋白的動態(tài)變化:P組小鼠結(jié)腸組織c-Kit蛋白第4W(P組/C組:0.82±0.03)開始持續(xù)下降，第8W(P組/C組:0.65±0.04)后明顯降低(P＜0.05)。12W內(nèi)C組無明顯動態(tài)變化。
　　結(jié)