高特異性免疫分子化磁性載體快速檢測病原菌的研究.pdf

1、金黃色葡萄球菌(Staphylococ cus.aureus)和 G 群鏈球菌(Group G Sreptococcus) 這兩種極具代表性的醫(yī)源性感染及群發(fā)性感染病原菌的快速檢測和分離是基于人IgG分子的Fc端分別與位于這兩種病原菌表面的金黃色葡萄球菌A蛋白(SPA)以及鏈球菌G蛋白(SPG)之間存在特異性親和反應的原理進行的。由于與SPA/SPG的結合位點是位于人IgG分子的Fc端而不是傳統意義上的免疫識別位點Fab端。因此抗體固定

2、化的標準與傳統免疫傳感器抗體固定化標準完全不同。在本研究中要求固定在載體——磁性微球表面人IgG分子的Fc 端能充分曝露出來，以便于SPA/SPG的接近與結合。與此相反，傳統的免疫傳感器則要求抗體固定在載體表面后其Fab端能易于抗原的接近與結合從而促進抗原一抗體的免疫識別結合反應。總之，對于傳統免疫傳感器來說較差的抗體固定化方法反而能在對金黃色葡萄球菌和G群鏈球菌的檢測中取得更好的結果。 本文首先通過化學方法分別合成了三種具有不

3、同功能基團的磁性微球 (magnetic beads，MB)。其中表面含有醛基的磁性微球粒徑為 10-20μm；表面含有IDA-Cu基團的磁性微球粒徑為5-15μm；表面含有氨基的磁性微球粒徑為15-30 u m。紅外光譜分析不但證實了這三種磁性微球表面含有相應的功能基團，而且還包被有Fe<,3>O<,4>的核心使得合成的微球具有超順磁性。 將人IgG分子分別固定到具有三種不同功能基團的磁性微球表面制備得到了能用于快速、簡便地檢