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文檔簡介
1、面對淡水資源嚴(yán)重不足、土地鹽漬化日益嚴(yán)重、人口不斷增長的現(xiàn)狀,如何利用豐富的海水資源和大面積的灘涂,已經(jīng)成為急需解決的重大課題。近年來,采用基因工程方法提高植物耐鹽性的研究取得了令人矚目的進(jìn)展,別是通過抗鹽基因轉(zhuǎn)化在一定程度上使植物的耐鹽性得到了提高?,F(xiàn)有的研究表明,植物的耐鹽性是一個(gè)多基因控制的復(fù)雜性狀,依賴于多個(gè)基因之間的相互作用,因此只將單個(gè)基因?qū)胫参铽@得的抗逆性是有很大局限性的。一般認(rèn)為,將多個(gè)與耐鹽相關(guān)的基因轉(zhuǎn)入同一植物中對
2、耐鹽性的提高會(huì)大大優(yōu)于只轉(zhuǎn)入單個(gè)基因。 小分子滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的積累是植物抵御鹽脅迫的主要方式,其中又可分為調(diào)節(jié)無機(jī)鹽的吸收和積累以及滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的合成兩大類。本文通過向煙草中導(dǎo)入滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)甜菜堿合成的關(guān)鍵酶來提高植株的抗性。 實(shí)驗(yàn)中以農(nóng)桿菌介導(dǎo)法向轉(zhuǎn)CMO(鹽角草膽堿單加氧酶編碼基因)的煙草株系中轉(zhuǎn)入鹽角草磷酸乙醇胺-N-甲基轉(zhuǎn)移酶基因(PEAMT)。通過對轉(zhuǎn)PEAMT、CMO雙基因煙草,轉(zhuǎn)CMO單基因煙草及野生型對照的
3、甜菜堿含量測定及耐鹽性比較,分析甜菜堿合成相關(guān)酶的導(dǎo)入對植物耐鹽性提高的作用。 經(jīng)過PCR分子檢測結(jié)果證明,PEAMT基因已經(jīng)整合到目標(biāo)植物基因組中。對甜菜堿含量的測定結(jié)果顯示轉(zhuǎn)雙基因及轉(zhuǎn)單基因的煙草甜菜堿含量均顯著高于對照,且轉(zhuǎn)雙基因植株甜菜堿含量高于轉(zhuǎn)單基因植株。植物光合速率(Pn)、相對電導(dǎo)率(Rc/Rc’)、葉綠素含量(Ch1a+b)、測定結(jié)果表明,鹽脅迫下,轉(zhuǎn)雙基因的煙草植株各項(xiàng)生理指標(biāo)均優(yōu)于轉(zhuǎn)單基因CMO的煙草。而二
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