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1、近年來(lái)有關(guān)魚(yú)類免疫系統(tǒng)形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能的研究日益受到重視,本文致力于大黃魚(yú)(Pseudosciaenacrocea)免疫系統(tǒng)形態(tài)結(jié)構(gòu)、發(fā)生和感染病理反應(yīng)的研究。對(duì)魚(yú)類免疫系統(tǒng)的研究,不僅有利于揭示脊椎動(dòng)物免疫系統(tǒng)的進(jìn)化規(guī)律,而且對(duì)魚(yú)類的健康養(yǎng)殖和可持續(xù)發(fā)展有著重要的應(yīng)用價(jià)值。論文取得如下主要結(jié)果: 1、大黃魚(yú)是我國(guó)重要的海水經(jīng)濟(jì)魚(yú)類。本文首次全面系統(tǒng)地研究了大黃魚(yú)的免疫系統(tǒng),包括頭腎、脾臟、胸腺以及粘膜樣淋巴組織(鰓)的組織結(jié)構(gòu)和
2、細(xì)胞特征。大黃魚(yú)的頭腎主要集中于腎臟前部2個(gè)分叉部分:組織學(xué)研究證明,頭腎是由基質(zhì)組織網(wǎng)絡(luò)著不同發(fā)育階段的血細(xì)胞構(gòu)成,無(wú)腎小球等分泌結(jié)構(gòu)。超微觀察進(jìn)一步表明,基質(zhì)是由網(wǎng)狀細(xì)胞和成纖維細(xì)胞等組成,各種免疫細(xì)胞由淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、Ⅰ型顆粒細(xì)胞和Ⅱ型顆粒細(xì)胞以及巨噬細(xì)胞等組成。大黃魚(yú)頭腎內(nèi)免疫細(xì)胞種類比較豐富,是免疫細(xì)胞的主要生發(fā)中心。大黃魚(yú)脾臟實(shí)質(zhì)無(wú)明顯的紅髓和白髓區(qū)分。胸腺無(wú)明顯的內(nèi)區(qū)和外區(qū)之分。 大黃魚(yú)的鰓小片主要由扁平上皮細(xì)
3、胞和柱狀細(xì)胞構(gòu)成,血竇腔極為發(fā)達(dá)。血竇內(nèi)主要為紅細(xì)胞,免疫細(xì)胞包括淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞和顆粒細(xì)胞,此外,還有泌氯細(xì)胞和粘液細(xì)胞。研究結(jié)果表明,大黃魚(yú)鰓的免疫區(qū)位于鰓小片基部,鰓在局部粘膜免疫中具有重要作用,是魚(yú)類免疫體系的有機(jī)組成部分之一。 2、研究了大黃魚(yú)免疫系統(tǒng)發(fā)生。應(yīng)用顯微與超微技術(shù)研究了大黃魚(yú)初孵仔魚(yú)至60日齡幼魚(yú)的免疫器官—頭腎、胸腺與脾臟的發(fā)育。結(jié)果表明,免疫器官原基出現(xiàn)的先后順序是頭腎、脾臟和胸腺。3日齡仔魚(yú)出現(xiàn)頭腎
4、原基,4日齡仔魚(yú)出現(xiàn)脾臟和胸腺原基。免疫器官出現(xiàn)小淋巴細(xì)胞順序是胸腺、頭腎和脾臟,淋巴組織的發(fā)育相對(duì)滯后。在大黃魚(yú)仔魚(yú)早期發(fā)育階段,非特異性免疫系統(tǒng)起著重要作用。 3、系統(tǒng)地研究了初孵仔魚(yú)至12月齡大黃魚(yú)頭腎、脾、胸腺等免疫系統(tǒng)的發(fā)育變化,闡明了免疫器官發(fā)育與年齡、體重的關(guān)系。除了胸腺之外,大黃魚(yú)所有免疫器官都隨著魚(yú)齡的增長(zhǎng)而生長(zhǎng)。免疫器官的重量與體重的關(guān)系要比與年齡的關(guān)系密切。免疫器官內(nèi)總的白細(xì)胞數(shù)量隨著年齡增長(zhǎng)而增加。顯微和
5、超微結(jié)構(gòu)研究都表明,大黃魚(yú)免疫器官發(fā)育直到幼魚(yú)階段才逐步完善。脾臟和頭腎有混合的紅細(xì)胞和白細(xì)胞群,頭腎比脾臟的淋巴化程度高。胸腺在孵化后12個(gè)月內(nèi)沒(méi)有退化現(xiàn)象。 4、采用蛋白A親和層析法對(duì)大黃魚(yú)血清中的特異性免疫球蛋白(IgM)進(jìn)行分離純化,所得產(chǎn)物用SDS—PAGE進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果表明,蛋白A親和層析法可以較好地分離到高純度的大黃魚(yú)血清IgM,產(chǎn)物的電泳膠中只有重鏈和輕鏈2個(gè)條帶;大黃魚(yú)免疫球蛋白重鏈的分子量約69kDa,輕鏈分
6、子量約28kDa。 5、研究了大黃魚(yú)感染哈維氏弧菌后免疫系統(tǒng)組織病理學(xué)及血清中生化指標(biāo)變化。對(duì)患病大黃魚(yú)的病理組織學(xué)的研究發(fā)現(xiàn)被感患病大黃魚(yú)頭腎、脾、胸腺、肝和粘膜性淋巴組織腸等組織的出現(xiàn)不同程度的病變,具體表現(xiàn)為腎小管上皮細(xì)胞和脾內(nèi)細(xì)胞變性、壞死,胸腺中出現(xiàn)較多空泡,肝細(xì)胞胞漿內(nèi)脂滴積累增多,腸粘膜上皮細(xì)胞壞死、脫落。 大黃魚(yú)血清中生化指標(biāo)檢測(cè)表明,患病大黃魚(yú)血清中Ca+、K+、Cl—濃度上升,而Na+濃度略有下降,谷
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