水楊酸鈉促進(jìn)鈣蛋白酶1在下丘神經(jīng)元的表達(dá).pdf

1、目的:1、研究水楊酸鈉（Sodium salicylate，ss）對(duì)Sprague-Dawley(SD)大鼠聽(tīng)力閾值以及聽(tīng)性腦干反應(yīng)(Auditory Brainstem reflect，ABR)檢測(cè)Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ波潛伏期以及Ⅰ-Ⅴ、Ⅲ-Ⅴ波間潛伏期改變，分析水楊酸鈉作用不同時(shí)間后，對(duì)大鼠聽(tīng)力的影響。2、觀察鈣蛋白酶1（calpain1）在下丘定位，以及水楊酸鈉對(duì)SD大鼠下丘神經(jīng)元calpain1表達(dá)的影響。3、研究下丘鈣蛋白酶表達(dá)量與大鼠

2、聽(tīng)力損害程度的關(guān)系，探討水楊酸鈉聽(tīng)力損害與鈣蛋白酶1的關(guān)系。
　　方法:1、采用美國(guó)產(chǎn)Bio-logic多功能電生理儀對(duì)大鼠進(jìn)行ABR檢測(cè)，將聽(tīng)力閾值檢測(cè)結(jié)果小于40dB SPL的健康成年的SD大鼠歸為實(shí)驗(yàn)對(duì)象。2、分組取其中符合標(biāo)準(zhǔn)、雌雄不限、體重在200g到250g范圍的健康成年大鼠72只，隨機(jī)分為4組，每各組18只大鼠。對(duì)照組:腹腔注射生理鹽水;水楊酸鈉組（ss組）:腹腔注射水楊酸鈉;鈣蛋白酶抑制劑組(ALLN組):腹腔注射

3、鈣蛋白酶抑制劑ALLN(N-acetyl-Leu-Leu-Norleucinal);ss+ALLN組:同時(shí)腹腔注射水楊酸鈉和ALLN。各組注射劑量根據(jù)每只大鼠體重計(jì)算，水楊酸鈉注射劑量為350mg/kg·d，鈣蛋白酶抑制劑注射劑量為10mg/kg·d，生理鹽水注射劑量與ss注射劑量體積相同。3、檢測(cè)在對(duì)各組大鼠進(jìn)行處理前先適應(yīng)性飼養(yǎng)于無(wú)特定病原體級(jí)(Specific pathogenFree，SPF)級(jí)動(dòng)物房1周，并分別在注射生理鹽水及

4、藥物前1天、注射1周后以及注射4周，對(duì)各組大鼠進(jìn)行聽(tīng)性腦干反應(yīng)檢測(cè)每只大鼠的聽(tīng)力閾值，Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ波潛伏期以及Ⅰ-Ⅴ波、Ⅲ-Ⅴ波波間潛伏期，并在每次測(cè)量之后從每組中隨機(jī)抽出6只大鼠，用4％多聚甲醛通過(guò)心臟灌注固定后取出下丘，石蠟固定后通過(guò)免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)下丘鈣蛋白酶1表達(dá)量。
　　結(jié)果:1、隨水楊酸鈉應(yīng)用時(shí)間增加，大鼠聽(tīng)力閾值明顯增大(P＜0.01)，Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ波潛伏期以及Ⅰ-Ⅴ、Ⅲ-Ⅴ波間潛伏期延長(zhǎng)(P＜0.05)。2、在給予

5、ss處理后，隨時(shí)間增加，鈣蛋白酶1在下丘神經(jīng)元表達(dá)量增加(P＜0.01)，對(duì)照組鈣蛋白酶1表達(dá)量變化差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　結(jié)論:1、長(zhǎng)期應(yīng)用水楊酸鈉會(huì)導(dǎo)致大鼠聽(tīng)力閾值降低，且隨著應(yīng)用時(shí)間延長(zhǎng)，大鼠聽(tīng)力閾值越大。2、正常情況下，鈣蛋白酶1在大鼠下丘中央核神經(jīng)元胞質(zhì)內(nèi)少量表達(dá)，長(zhǎng)時(shí)間應(yīng)用ss會(huì)引起下丘中央核鈣蛋白酶1表達(dá)量增高，且隨ss應(yīng)用時(shí)間增加鈣蛋白酶1表達(dá)量增高。3、下丘中央核神經(jīng)元內(nèi)鈣蛋白酶1表達(dá)量越大對(duì)大鼠