蛋白質(zhì)非共價(jià)鍵復(fù)合物和天然產(chǎn)物的質(zhì)譜方法研究.pdf

1、中南民族大學(xué)碩士學(xué)位論文蛋白質(zhì)非共價(jià)鍵復(fù)合物和天然產(chǎn)物的質(zhì)譜方法研究姓名：趙文杰申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：@指導(dǎo)教師：王獻(xiàn)20100524蛋白質(zhì)非共價(jià)鍵復(fù)合物和天然產(chǎn)物的質(zhì)譜方法研究2處理后即可進(jìn)行GCMS分析，否則，需要運(yùn)用LCMS進(jìn)行分析。LCMS一般分析樣品的水、甲醇或乙腈溶液[3]，主要得到樣品的分子量信息，串聯(lián)質(zhì)譜儀還能得到部分結(jié)構(gòu)信息，運(yùn)用高分辨質(zhì)譜儀還能夠得到化合物的結(jié)構(gòu)式。測(cè)定非極性樣品時(shí)，可以運(yùn)用APCI源，而測(cè)定極性樣

2、品一般運(yùn)用ESI源。本章主要闡述質(zhì)譜方法特別是ESIMS方法應(yīng)用于蛋白質(zhì)和配體分子形成非共價(jià)復(fù)合物的研究，重點(diǎn)介紹了ESIMS及GCMS的基本原理及其發(fā)展應(yīng)用，還介紹了天然產(chǎn)物多糖及其GCMS分析等。1.2蛋白質(zhì)非共價(jià)鍵復(fù)合物及ESIMS1.2.1蛋白質(zhì)非共價(jià)鍵復(fù)合物生物分子的弱相互作用、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和生物功能的關(guān)系是科研工作者們普遍關(guān)注的研究方向。而蛋白質(zhì)間或蛋白質(zhì)與其它分子的非共價(jià)鍵作用如抗原與抗體的結(jié)合、藥物分子與靶點(diǎn)蛋白質(zhì)的結(jié)合以

3、及酶與底物的結(jié)合等在許多生物化學(xué)過程中起著重要作用[47]。非共價(jià)鍵作用有四種主要類型:氫鍵、疏水作用、分子間作用力、金屬鍵。測(cè)定非共價(jià)鍵結(jié)構(gòu)的方法主要有光譜法(紅外、UV、熒光、圓二色譜法等)、色譜法、XRay晶體衍射法、核磁共振（NMR）以及超離心技術(shù)等。光譜法可給出蛋白質(zhì)及復(fù)合物的三維結(jié)構(gòu)的變化信息而X射線晶體衍射、核磁共振分別提供了固相、液相中生物大分子及復(fù)合物的高精度結(jié)構(gòu)信息。但靈敏度差、樣品量大、費(fèi)耗時(shí)并且需要純度較高的樣品

4、等是這些技術(shù)的缺陷[6]。到目前為止運(yùn)用ESIMS觀測(cè)到的蛋白質(zhì)非共價(jià)鍵復(fù)合物有蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)[89]、蛋白質(zhì)配體[1015]及蛋白質(zhì)金屬離子[1618]、蛋白質(zhì)寡核苷酸[19]、蛋白質(zhì)雙鏈DNA[20]等。“軟”電離電噴霧離子化技術(shù)被廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)非共價(jià)鍵復(fù)合物的研究[7]。1.2.2ESI原理及特點(diǎn)很久以來，質(zhì)譜一直被用來分析小分子化合物。20世紀(jì)80年代，兩個(gè)獨(dú)特的應(yīng)用領(lǐng)域向?qū)嵱觅|(zhì)譜技術(shù)提出了挑戰(zhàn)：（1）分析大分子化合物；（2）迫