自體骨髓提取物Buffy Coat與透明質(zhì)酸復(fù)合物對軟骨再生的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:探討自體骨髓提取物BuffyCoat和透明質(zhì)酸（Hyaluronic Acid, HA）復(fù)合物對兔膝關(guān)節(jié)軟骨的再生的影響，為Buffy Coat修復(fù)軟骨的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:將成年新西蘭大白兔36只（16周齡，體重3.0kg-3.5kg）隨機(jī)分為三組（A組、B組和C組），每組12只大白兔，A組軟骨缺損處只注射透明質(zhì)酸;B組只注射Buffy Coat;C組注射Buffy Coat與透明質(zhì)酸復(fù)合物。Buffy Co

2、at提取在大白兔髂前上棘處提取骨髓進(jìn)行分離獲得Buffy Coat，制備軟骨缺損模型選擇大白兔右膝關(guān)節(jié)的股骨髁滑車處造軟骨缺損直徑約5mm，深于2mm。術(shù)后第4周和第8周進(jìn)行取標(biāo)本，肉眼觀察軟骨缺損區(qū)外觀并拍照保存資料。病理學(xué)觀察進(jìn)行常規(guī)脫鈣、脫水、蠟塊包埋、病理切片、潘紅O染色、封片，在顯微鏡下觀察觀察再生軟骨細(xì)胞形態(tài)學(xué)、染色現(xiàn)象、結(jié)構(gòu)完整性、表面整齊性、軟骨厚度、再生的軟骨下骨、再生軟骨和周圍正常組織整合情況并拍照保存資料以及請三名

3、相關(guān)實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)行ICRS評分并對三組標(biāo)本評分結(jié)果統(tǒng)計(jì)學(xué)比較分析。
　　結(jié)果:1.肉眼觀察:術(shù)后第4周見A組缺損區(qū)保持缺陷，B組中的缺損區(qū)可見修復(fù)組織部分填充缺陷區(qū)，C組中的缺陷的填充程度比B組較寬，仍未填充滿。術(shù)后第8周三組的缺損區(qū)已被填充滿，A組的修復(fù)組織明顯發(fā)白與周圍正常軟骨明顯分開，而B組和C組表面光滑接近于周圍正常軟骨，但有少量發(fā)白。2.鏡下觀察:術(shù)后第4周C組潘紅O染色觀察染色現(xiàn)象輕微減少、表面中等與B組和A組比較好，A

4、組大部分無修復(fù)軟骨、軟骨下骨未重建，B組和C組大部分纖維軟骨修復(fù)，軟骨下骨部分重建。術(shù)后第8周A組纖維組織修復(fù)，表面層較粗糙，軟骨下骨部分重建。B組中的修復(fù)組織表面較整齊但仍不規(guī)則，并發(fā)現(xiàn)大量的膠原纖維，細(xì)胞分布由具有透明性質(zhì)的柱狀和簇狀細(xì)胞組成，但細(xì)胞的排列較亂，重建的軟骨下骨大部分重建而不規(guī)則的，也未觀察到軟骨組織和周圍軟骨之間的整合。C組中的缺陷區(qū)比B組整齊接近周圍正常軟骨表面，并發(fā)現(xiàn)大量的膠原纖維與正常軟骨類似的膠原纖維的良好定

5、向排列，細(xì)胞的排列大部分類似正常軟骨細(xì)胞排列，觀察到有兩邊的修復(fù)組織與周圍組織也未能融合，重建軟骨下骨大部分重建。ICRS評分及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:第4周三組比較明顯有差異(P＜0.05)，組間比較C組軟骨修復(fù)效果優(yōu)于B組和A組，顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，有明顯差異(P＜0.05)，第8周ICRS評分三組比較明顯有差異(P＜0.05)，組間比較B組和C組無明顯差異(P＞0.05)，通過第4周和第8周ICRS評分可以看到每組的評分隨時(shí)間的推移評分越高。