沉默SAA表達對CNE2細(xì)胞生長增殖的影響.pdf

1、目的：
　　沉默SAA基因在鼻咽癌CNE2細(xì)胞中的表達，研究分析SAA基因表達降低，對CNE2細(xì)胞生長增殖、BCL-2、Caspase-3及NF-КB表達的影響，初步探討SAA基因的功能及分子機制。
　　方法：
　　本研究將前期已成功構(gòu)建的SAA表達干擾載體pGPU6/GFP/Neo-SAA，采用脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染 CNE2細(xì)胞，G418篩選，克隆挑選，建立SAA穩(wěn)定低表達的pGPU6/GFP/Neo-SAA-CNE2細(xì)胞系

2、，以pGPU6/GFP/Neo-CNE2細(xì)胞系、未轉(zhuǎn)染的CNE2細(xì)胞系為對照組；運用流式細(xì)胞儀檢測三組細(xì)胞的細(xì)胞周期改變；使用平皿克隆實驗，檢測細(xì)胞的生長增殖能力；以western blotting檢測BCL-2、Caspase-3及NF-КB在pGPU6/GFP/Neo-SAA-CNE2細(xì)胞系的表達水平。
　　結(jié)果：
　　1、western blotting檢測結(jié)果示，SAA在pGPU6/GFP/Neo-SAA-CNE2細(xì)

3、胞系中表達降低；
　　2、流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果顯示，在 pGPU6/GFP/Neo-SAA-CNE2細(xì)胞系中，處于分裂期的CNE2細(xì)胞數(shù)目減少；
　　3、平皿克隆實驗結(jié)果顯示，pGPU6/GFP/Neo-SAA-CNE2細(xì)胞的生長增殖能力降低；
　　4、western blotting檢測結(jié)果示，pGPU6/GFP/Neo-SAA-CNE2細(xì)胞系中的BCL-2表達降低，Caspase-3及NF-КB的表達增多。